应用一种新的动态学方法来研究决定化和使用犬类模型的抗体原体的影响†

科学领域:

• 生殖生物学 生殖生物学
• 细胞信号传递 细胞信号传递
• 分子内分泌学分子内分泌学

背景情况:

• 母乳叶细胞对于维持犬胎孕至关重要.
• 果细胞在狗胎盘中独特地表达孕激素受体 (PGR).
• 破坏孕激素 (P4) /PGR信号传递会终止怀孕.

研究的目的:

• 为了研究在体外分离过程中不朽化狗子宫支流 (DUS) 细胞的基因组的变化.
• 探索cAMP依赖激酶在犬类决定化中的作用.
• 为了确定孕激素受体对抗作用在决定化过程中对激酶活性的影响.

主要方法:

• 利用氨酸/氨酸激酶 (STK) PamChip测定用于对DUS细胞的基因组分析.
• 使用cAMP诱导的体外决定化.
• 使用2型抗体 (aglepristone,mifepristone) 来阻止PGR信号传递.
• 通过干扰PKA和MEK1/2.2.等特定激酶进行了针对性的研究.
• 通过与现有的转录基因数据进行比较,分析了转录效应.

主要成果:

• 脱二化激活了85个STK,包括蛋白激酶A (PKA),PKC,细胞外信号调节激酶 (ERK1/2),基激活蛋白激酶 (MAPK),/卡尔莫杜林依赖蛋白激酶 (CAMK) 和Akt1/2.2.
• 用抗体原来阻断PGR降低了大多数决定化调节激酶的活性.
• 干扰PKA或MAPK激酶 (MEK)1/2降低了关键决定性化标志物 (IGF1,PTGES,PRLR,PGR,PTGS2/COX2) 的调节.
• PKC抑制降低了IGF1,PGR和PTGS2mRNA,但没有降低PTGES和PRLR.
• 抑制PKA降低了cJUN和CREB酸化,而PKC抑制只影响了cJUN.

结论:

• 狗的决定化是一个依赖激酶的过程,涉及到广泛的STKs.
• 孕激素/PGR信号传递对于在决定化过程中维持激酶活性至关重要.
• PKA和PKC在调节决定化标记物和转录因子方面发挥着不同的作用.