蛋白质和脂质膨胀显微镜与素和胺信号放大用于3D成像
Ueh-Ting Tim Wang1,2, Xuejiao Tian2,3,4, Yae-Huei Liou5
1Affiliated Senior High School of National Taiwan Normal University, Taipei, 106348, Taiwan.
Scientific reports
|December 11, 2023
概括
我们开发了TT-ExM,一种新的扩展显微镜方法,使用素和胺信号放大. 该技术增强光信号和蛋白质保留,使细胞结构的高分辨率成像成为可能.
科学领域:
- 细胞生物学 细胞生物学
- 显微镜技术 显微镜技术
- 生物化学 生物化学
背景情况:
- 扩展显微镜 (ExM) 通过物理扩大细胞来实现超分辨率.
- 由于蛋白质分解和胀,ExM遭受了光信号的减少.
- 复杂的协议阻碍了ExM的广泛采用.
研究的目的:
- 通过增强光信号和蛋白质保留来改善ExM.
- 为了更广泛的可访问性,简化ExM协议.
- 为了实现包括脂质在内的细胞结构的高分辨率3D成像.
主要方法:
- 修改ExM与素消化以最大限度地减少蛋白质损失.
- 集成的胺信号放大 (TSA) 来提高光.
- 应用了双试和胺治疗,称为TT-ExM.
- 在COS-7细胞中利用TT-ExM进行抗体和脂质染色.
主要成果:
- 通过TT-ExM,表现出细胞内膜网膜和线粒体标记物保持的改善.
- 高分辨率的3D脂质染色揭示了复杂的细胞膜结构.
- 结合脂质和DNA染色可视化了线粒体和核脂质丰富的结构.
- 在线粒细胞中观察到富含脂质的染色体矩阵.
结论:
- 在扩展显微镜中,TT-ExM显著提高了光信号和图像质量.
- 该方法允许使用易于获得的试剂进行高质量,超细分辨率的3D成像.
- TT-ExM对于在整个扩展细胞中可视化各种细胞组件,包括脂质和DNA,是非常实用的.
