对SARS-CoV-2的水溶性核囊蛋白的表达及其免疫性分析

科学领域:

• 病毒学 病毒学
• 免疫学 免疫学 免疫学
• 生物技术是生物技术.

背景情况:

• 冠状病毒疾病2019 (COVID-19),由SARS-CoV-2引起,仍然是一个重大的全球健康挑战.
• 在SARS-CoV-2核体 (N) 蛋白质是丰富的,并引起早期抗体反应,使其成为诊断的关键目标.
• 大规模的N蛋白生产对于开发免疫测试来检测SARS-CoV-2抗体和控制病毒传播至关重要.

研究的目的:

• 开发一种大规模制备水溶性SARS-CoV-2 N蛋白质的方法.
• 描述复合N蛋白的免疫性和表位特征.
• 为了产生针对SARS-CoV-2 N蛋白的单克隆抗体,用于潜在的诊断应用.

主要方法:

• 诱导水溶性N蛋白表达在25°C与0.5mMIPTG进行12小时.
• 西方斑点和ELISA测定验证了疫苗诱导血清对复合N蛋白的识别.
• 使用ELISA,IPMA和IFA进行单克隆抗体生产和表征的混合体技术.

主要成果:

• 再组合的N蛋白被认可来自于用Sinovac无活化SARS-CoV-2疫苗接种疫苗的个体的血清.
• 成功生成了四种单克隆抗体 (2B1B1,4D3A3,5G1F8,7C6F5),其ELISA标位超过1.28×10^6.0.
• 单克隆抗体在各种测试中表现出与N蛋白的特异反应性,证实了本地表位的存在.

结论:

• 准备的水溶性N蛋白具有高度免疫性,并与原生SARS-CoV-2N蛋白共享表位.
• 成功生产水溶性N蛋白及其特定单克隆抗体为开发先进的COVID-19诊断免疫试验提供了基础.
• 这项工作有助于通过改进的检测方法控制SARS-CoV-2传播的持续努力.