新型三明治免疫检测检测到由Vibrio parahaemolyticus产生的导致AHPND的二元PirABVp毒素
Min-Young Jeon1,2, Jee Eun Han3, Dong Gwang Lee1
1Biotherapeutics Translational Research Center, Korea Research Institute of Bioscience & Biotechnology (KRIBB), Daejeon, Republic of Korea.
Frontiers in cellular and infection microbiology
|December 13, 2023
概括
一种新的三明治ELISA免疫测试检测了来自Vibrio parahaemolyticus的PirA/PirB毒素 (PirABVp),使得的急性肝瘤缩病 (AHPND) 的蛋白质水平诊断成为可能. 这种方法提供了一种可靠的工具来评估的健康状况和V. 帕拉海莫利蒂克斯 (parahaemolyticus) 的病毒性.
科学领域:
- 水产养殖是水产养殖的一种方式.
- 兽医科学 兽医科学 兽医科学
- 分子生物学分子生物学
背景情况:
- 中的急性肝胰腺亡病 (AHPND) 是由来自Vibrio parahaemolyticus (PirAB) 的PirA/PirB毒素复合体引起的.
- 目前基于PCR的诊断检测基因,但不能检测毒素蛋白质,限制了准确性,因为一些菌株缺乏蛋白质表达.
- 要直接检测PirABVp分子,需要进行免疫试验.
研究的目的:
- 开发一种敏感的三明治ELISA免疫试验,用于在蛋白质水平上检测PirABVp毒素.
- 为诊断应用创造PirA和PirB子单元的特定抗体.
主要方法:
- 使用菌体显示,针对PirA和PirB子单元的选择单链可变片段 (scFv) 抗体.
- 将scFvs转化为IgG抗体,以建立一个三明治ELISA.
- 使用复合PirABVp和细菌蛋白质溶解物验证了免疫试验.
主要成果:
- 开发的IgG抗体表现出亚纳米到纳米的亲和力 (KD).
- 三明治ELISA实现了复合PirABVp的201.7 ng/mL的检测极限.
- 在V.中成功检测到PirABVp 甲状腺溶解物和受感染的样本.
结论:
- 开发的三明治ELISA是通过检测PirABVp蛋白来诊断AHPND的可靠方法.
- 这种免疫测试可以准确地确定V的毒性. 在养殖中使用的parahaemolyticus菌株.
- 该工具通过提供精确的疾病诊断来支持全球养殖业.
