在聚合的Simulium sp.中对Onchocerca volvulusDNA的实时qPCR检测的优化策略 黑的载体是黑的载体

科学领域:

• 寄生虫学的寄生虫学
• 分子诊断学 分子诊断
• 公共卫生 公共卫生

背景情况:

• 杆性杆菌会导致衰弱性皮肤炎和失明,特别是在撒哈拉以南非洲.
• 随着全球的重点转向消除,与ivermectin一起的大规模药物管理 (MDA) 对于控制桃病至关重要.
• 准确的监测数据对于确定何时停止MDA并防止疾病复发至关重要.

研究的目的:

• 评估和比较候选定量PCR (qPCR) 试验,以提高检测O. volvulus在其载体中的灵敏度和物种特异性.
• 确定一种实用的,标准化的分子诊断工具,用于科切西斯监测.

主要方法:

• 几项候选qPCR测定的比较,包括针对OvND5和O150DNA序列的测定.
• 用热稳定试剂评估测定灵敏度,物种特异性和性能.
• 评估诊断工具的实用性,包括试剂稳定性和成本效益.

主要成果:

• 与O150 qPCR试验相比,针对线粒体DNA (OvND5) 的qPCR试验显示出更高的灵敏度和物种特异性.
• 在OvND5测定成功检测到19/20池的黑头刺与单一的O. volvulus幼虫 (L3).
• 在O150 qPCR测定检测到16/20尖池.

结论:

• 鉴于对PCR抑制剂的增强敏感性,特异性和耐药性,OvND5 qPCR测定被确定为现场样本中检测O. volvulus的最佳目标.
• 用于OvND5测定的试剂在室温下稳定,简化了物流.
• 拟议的qPCR协议提供了一种更简单,更快速,更具成本效益的替代方案,用于目前的分子诊断方法,用于肉病监测.