一个mRNA COVID-19疫苗的无抗体评估
Paul J Branham1, Hans C Cooper2, Yulanda M Williamson2
1Oak Ridge Institute for Science and Education, Centers for Disease Control and Prevention, Atlanta, GA, 30341, USA.
概括
在高温下储存的过期的mRNA COVID-19疫苗材料显示减少了尖端蛋白表达. 超冷储存和冷解周期对哺乳动物细胞中的抗原产生影响最小.
科学领域:
- 生物化学 生物化学
- 分子生物学分子生物学
- 疫苗学 疫苗学 疫苗学
背景情况:
- 包括COVID-19疫苗在内的mRNA疫苗依赖于宿主细胞中特定抗原的表达.
- 了解mRNA疫苗材料在各种存储条件下的稳定性,对于保持疫苗有效性至关重要.
- 准确量化抗原表达对于疫苗质量控制和研究至关重要.
研究的目的:
- 评估不同储存条件 (4°C,室温,56°C和冷解周期) 对mRNA COVID-19疫苗材料的影响.
- 在暴露于各种存储条件后,量化哺乳动物细胞中尖端蛋白抗原表达.
- 为了证明结合细胞转染和同位素稀释质谱法 (IDMS) 的分析试验对无抗体蛋白质量定量的有用性.
主要方法:
- 哺乳动物细胞 (BHK-21) 被感染过期的mRNA COVID-19疫苗材料,经过5周的受控储存条件.
- 使用同位素稀释质谱法 (IDMS) 每周量化尖端蛋白质表达.
- 同时量化了家政蛋白质 (β-actin和GAPDH),以正常化细胞计数变化.
主要成果:
- 在高温 (室温和56°C) 储存的疫苗材料导致与在4°C储存相比,尖端蛋白的表达显著减少.
- 暴露于5个冷解周期或存储在超低温条件下对尖端蛋白表达的影响较小.
- IDMS提供了表达的尖端蛋白的准确,无抗体量化,证明了其在疫苗分析中的有用性.
结论:
- 高温会损害mRNA COVID-19疫苗材料的完整性,导致尖端蛋白的表达减少.
- 在超低温条件下和冷解周期后,mRNA疫苗材料表现出相对稳定性.
- 描述的基于IDMS的分析试验是一种可靠的方法来量化mRNA疫苗的抗原表达,为抗体依赖方法提供了替代方案.
