开发一种大规模的病原体查测试,用于对犬类介质细胞干细胞的生物安全性评估
Emese Pekker1,2,3, Katalin Priskin3, Éva Szabó-Kriston4
1HCEMM-HUN-REN BRC Mutagenesis and Carcinogenesis Research Group, Institute of Genetics, HUN-REN Biological Research Centre, Szeged, H-6726, Hungary.
Biological procedures online
|December 15, 2023
概括
这项研究开发了敏感的核酸测试,以检测犬类介质干细胞 (MSC) 批次中的病原体,确保狗体再生医学应用的安全性. 经过验证的测试确定了各种犬类病原体,包括引起肠炎和传播疾病的病原体.
科学领域:
- 兽医医学 兽医医学 兽医医学
- 再生医学是一种再生医学.
- 分子诊断学 分子诊断
背景情况:
- 介质细胞干细胞 (MSCs) 在犬类再生医学中表现有前途.
- 确保犬类MSC批量的安全性需要根据良好的制造实践 (GMP) 进行质量控制.
- 现有的方法可能无法在MSC中充分检测到广泛的犬病原体.
研究的目的:
- 开发和验证一种灵敏,强大的基于核酸的测试面板,用于检测MSC中的犬病原体.
- 确保治疗用途的犬类MSC批次的安全性和纯度.
- 为了遵守欧洲药物管理局 (EMA) 关于质量控制的指南.
主要方法:
- 开发和验证传统和实时PCR分析.
- 评估分析灵敏度,特异性,放大效率和线性.
- 使用可行的尖端控制用于核酸提取质量.
- 对犬类MSC批次的直接测试和生物安全评估.
主要成果:
- 核酸测定表明高灵敏度 (100-1个副本/反应) 和特异性.
- 尖端控制证实了有效的核酸隔离.
- 对9个MSC批次的测试显示,其中一个对所有病原体呈阴性;其他的则显示出各种犬类病原体,包括和CIRDC病原体.
- 确定的特定病原体包括犬类帕尔沃病毒 (CPV),勒普托斯皮拉问询虫和Neospora caninum.
- 对12个MSC批次的生物安全评估显示,11个是无病原体的,其中一个为CPV呈阳性.
结论:
- 建立并验证了基于核酸的可靠,高度敏感和准确的犬病原体测试方法.
- 这些方法提高了用于再生医学的犬类MSC的安全性评估.
- 经过验证的试验为兽医再生医学中符合GMP的质量控制提供了至关重要的工具.
