基因编码的caspase传感器和RFP-LC3用于对亡-自的时间分析
Aneesh Chandrasekharan1, Shivanshu Kumar Tiwari1, Halikar Aman Munirpasha1
1Cancer Research Program, Rajiv Gandhi Centre for Biotechnology, Poojappura, Thycaud P.O., Thiruvananthapuram, Kerala 695014, India.
International journal of biological macromolecules
|December 15, 2023
概括
这项研究开发了新的传感器细胞,可以实时同时跟踪自和亡. 研究结果显示,基底自促进了细胞在压力下对抗亡的存活.
科学领域:
- 细胞生物学 细胞生物学
- 分子生物学分子生物学
- 生物化学 生物化学
背景情况:
- 细胞命运是由亲死亡 (亡) 和亲生存 (自) 信号通路之间的平衡决定的.
- 这种平衡的失调与癌症,炎症和神经退行等疾病有关.
- 在单细胞水平上同时实时检测自和亡对于理解它们的交叉通话至关重要.
研究的目的:
- 开发和验证一种新的双传感器系统,用于同时实时监测自和亡.
- 在各种压力条件下调查自和亡之间的时间关系.
- 评估3D培养对自和亡动态的影响.
主要方法:
- 产生稳定的传感器细胞,共同表达RFP-LC3 (自标志物) 和基于FRET的核定位信号的酶激活探头.
- 使用特定的细胞治疗方法进行活细胞成像和功能验证.
- 同焦显微镜和高通量选适应性评估.
主要成果:
- 在压力下诱导快速细胞死亡往往会抑制自信号传递.
- 缓慢的细胞死亡诱导触发了同时的自信号和酶激活.
- 实时成像显示了依赖时间的转向抑制自的酶激活的转变,表明基底自赋予了生存.
- 与单层培养相比,3D细胞培养表现出更高的自水平.
结论:
- 开发的传感器系统可以同时实时监测自和亡.
- 在压力条件下,基底自对亡起着保护作用.
- 3D培养环境调节自动力学,可能增强细胞存活.
- 传感器系统可适应影响自和亡通路的化合物的高通量选.
