使用工程Escherichia coli全细胞催化剂高效地生产γ-氨基黄油酸
Fangfang Chang1, Yuheng Wang1, Jie Zhang1
1State Key Laboratory of Animal Nutrition and Feeding, Institute of Animal Science, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100193, China.
Enzyme and microbial technology
|December 16, 2023
概括
工程化大肠杆菌有效地从L-谷氨酸中产生高产量的氨酸 (GABA). 这种新型生物催化剂消除了对辅助因子和细胞处理的要求,为工业应用铺平了道路.
科学领域:
- 生物技术是生物技术.
- 代谢工程是代谢工程.
- 工业微生物学 工业微生物学
背景情况:
- γ-氨基黄油酸 (GABA) 是一种有价值的化合物,具有多种工业应用.
- 以前使用工程Escherichia coli*生产GABA的全细胞催化剂需要细胞处理和辅助因子添加.
- 限制包括需要结解处理以提高细胞透性,以及需要化5'-酸盐 (PLP) 以提高酶活性.
研究的目的:
- 开发一种更高效,更强大的全细胞生物催化剂,用于GABA生产.
- 设计大肠杆菌以克服以前方法的局限性,例如PLP依赖性和细胞透性问题.
- 为了优化生物催化工艺的高产GABA生产.
主要方法:
- 在大肠杆菌中*gadz11*基因*的优化诱导表达条件.
- 通过过度表达*sulA*来改造*大肠杆菌,以增强细胞的透性,并创建一个自给自足的系统来消除PLP依赖.
- 优化了全细胞生物催化过程参数,包括基质度,细胞密度和反应温度.
主要成果:
- 在 37°C 6 小时内达到最佳的 *gadz11* 表达.
- 改造后的菌株表现出增强的细胞透性,并消除了对PLP的需求.
- 在最佳条件下,GABA产量为206.2g/L,转化率为100%,前所未有的生产率为117.8g/L/h,可重复使用两个周期.
结论:
- 一种新的工程 * E. coli * 菌株已成功开发,用于高效的GABA 生产.
- 该过程实现了从L-谷氨酸和L-单谷氨酸中报告的最高GABA生产率,没有辅助因子或细胞预处理.
- 这种工程菌株具有大规模工业GABA生产的巨大潜力.
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