使用静脉内孔焦显微镜和流式细胞计量来评估小鼠的细胞-真菌相互作用
Jigar V Desai1, Michail S Lionakis1
1Fungal Pathogenesis Section, National Institute of Allergy and Infectious Diseases, National Institutes of Health, Bethesda, MD 20892, USA.
STAR protocols
|December 19, 2023
概括
这项研究详细介绍了一项新的协议,用于分析骨髓菌细胞如何在小鼠脏中对抗真菌感染. 它可以在体内和体外详细研究细胞与真菌的相互作用.
科学领域:
- 免疫学 免疫学 免疫学
- 微生物学 微生物学
- 传染性疾病 传染性疾病
背景情况:
- 骨髓菌细胞对于对抗系统性真菌感染至关重要,比如疹病.
- 脏是系统性 кандидоз的小鼠模型中的主要脏.
- 了解细胞与真菌之间的相互作用是开发有效的抗真菌疗法的关键.
研究的目的:
- 提出一个全面的方案,以评估细胞和真菌的相互作用体内在系统性候群病期间小鼠脏内.
- 提供用于这些相互作用的静脉内成像和流细胞计分析的方法.
- 建立一种分离纯功能性细胞的程序,用于随后的ex vivo功能测定.
主要方法:
- 内共聚焦显微镜用于实时可视化细胞与菌相互作用.
- 流细胞计用于对细胞和真菌相互作用的定量分析.
- 一种脏组织解离协议,以分离高纯度的功能性细胞.
- 活体真菌吸收和杀死试验使用分离的细胞.
主要成果:
- 该协议允许详细的体内评估细胞对脏中的Candida的反应.
- 它有助于隔离可活的,功能性细胞进行进一步的ex vivo分析.
- 结合体内和体外的方法为研究抗真菌免疫提供了一个强大的模型.
结论:
- 该协议为研究人员提供了一套有价值的工具,用于研究系统性 кандидоз的宿主真菌相互作用.
- 它使我们能够更深入地了解髓菌细胞在脏内的抗真菌防御中的功能.
- 该方法可以适应用于研究固体器官中其他细胞介导的免疫反应.


