定量流细胞计能够实现跨平台细胞外囊泡研究的端到端优化
Sean Cook1, Vera A Tang2, Joanne Lannigan3
1Laboratory of Pathology, Translational Nanobiology Section, Centre for Cancer Research, National Institute of Health, National Institutes of Health, Bethesda, MD, USA.
Cell reports methods
|December 19, 2023
概括
这项研究引入了新的软件工具,以系统地优化流动细胞计 (FCM) 以进行细胞外粒子 (EP) 分析. 这些方法允许对病毒和细胞外囊泡 (EV) 研究进行标准化,跨平台的比较.
科学领域:
- 生物技术是生物技术.
- 分析化学 分析化学
- 细胞生物学 细胞生物学
背景情况:
- 流细胞计 (FCM) 被广泛用于表征像病毒和细胞外囊泡 (EVs) 这样的细胞外粒子 (EPs).
- 现有的报告准则 (例如,MIFlowCyt-EV) 涉及元数据和数据报告,但缺乏用于EP系统性FCM优化工具.
- 需要使用定量方法来标准化不同平台上的小颗粒的FCM分析.
研究的目的:
- 开发和介绍一套方法和软件工具,以优化用于EP分析的FCM设置.
- 为了使FCM系统和定量优化,用于小颗粒的表征.
- 为了促进EP数据的标准化跨平台比较.
主要方法:
- 引入自动化小颗粒优化 (SPOT) 管道,以优化FCM的光和光散射探测器设置.
- 应用定量FCM (qFCM) 来优化光板,激光功率,脉冲统计和窗口扩展.
- 通过使用商业电动汽车参考材料进行跨平台标准化研究进行验证.
主要成果:
- SPOT 管道和 qFCM 提供了用于 EP 分析的 FCM 的系统和定量优化.
- 演示优化FCM设置和光板,以提高EP检测和特征.
- 成功标准化跨平台的EP比较,减少因仪器差异而导致的变化.
结论:
- 开发的方法和软件工具显著改善了用于EP分析的FCM的优化和标准化.
- qFCM是一个有价值的工具,可以对细胞外粒子数据进行可靠的跨平台比较.
- 这项工作解决了EP分析中的一个关键缺口,为更强大和可重复的研究铺平了道路.
