在兴奋剂样本中非有针对性检测HIF稳定剂:使用稳定的体外生物试验进行基于活动的查
Liesl K Janssens1, Laurie De Wilde2, Peter Van Eenoo2
1Laboratory of Toxicology, Department of Bioanalysis, Ghent University, 9000 Ghent, Belgium.
Analytical chemistry
|December 20, 2023
概括
这项研究引入了一种新的生物活性测定,用于检测任何低氧诱导因子 (HIF) 稳定剂,无论其化学结构如何. 这种非有针对性的方法增强了对新增增强效药物的反兴奋剂努力.
科学领域:
- 生物化学和药理学 生物化学和药理学
- 反兴奋剂科学反兴奋剂科学
- 分析化学 分析化学
背景情况:
- 低氧诱导因子 (HIF) 稳定剂增强有氧能力,并被世界反兴奋剂机构禁止使用.
- 新兴的HIF稳定剂的结构多样性挑战了传统的基于结构的兴奋剂检测方法.
- 对于新型HIF稳定化合物存在广泛频谱检测方法的需求.
研究的目的:
- 开发和验证一种通用,结构独立的方法来检测HIF稳定器.
- 评估优化基于细胞的HIF试验对选各种HIF稳定剂的潜力.
- 为反兴奋剂控制建立一个补充检测策略.
主要方法:
- 优化先前开发的基于细胞的HIF1/2试验,将其转化为稳定的格式.
- 使用稳定生物试验对多种HIF稳定剂组的药理学表征.
- 在溶剂和尿样中确定检测极限,同时考虑矩阵效应.
主要成果:
- 优化的稳定生物测试表明,对各种HIF稳定剂具有广泛的特异性,包括enarodustat和JNJ-42041935.
- 罗沙沙斯塔特的方法检测极限在溶剂中为100nM,由于矩阵效应,在尿液中增加到50-100ng/mL.
- 对于roxadustat,确定了1.15μg/mL的实际尿检测极限,证实了依赖于矩阵的检测能力.
结论:
- 开发的非向生物测试方法可以检测HIF稳定活性,无论化学结构如何.
- 这种方法显示出作为补充工具的承诺在反兴奋剂控制中用于识别新型和未知的HIF稳定剂.
- 为了普遍应用,需要进一步优化样本准备和矩阵效应校正.
