针对从骨髓和脏中分离小鼠中性粒细胞的不同协议的比较研究
Khetam Sounbuli1,2, Ludmila A Alekseeva1, Oleg V Markov1
1Institute of Chemical Biology and Fundamental Medicine SB RAS, Lavrentiev Ave. 8, 630090 Novosibirsk, Russia.
International journal of molecular sciences
|December 23, 2023
概括
这项研究比较了分离中性粒细胞的四种方法,中性粒细胞是先天免疫的关键细胞. 对于骨髓,建议使用Ficoll密度梯度,而免疫磁性选择最适合中性粒细胞.
科学领域:
- 免疫学 免疫学 免疫学
- 细胞生物学 细胞生物学
背景情况:
- 中性粒细胞对天生的免疫力至关重要,并参与各种疾病.
- 隔离和培养中性粒细胞的挑战阻碍了研究进展.
研究的目的:
- 为了比较四种不同的隔离小鼠中性粒细胞的协议.
- 评估基于纯度,可行性,产量和成本的隔离方法.
主要方法:
- 使用Ficoll (1.077/1.119 g/mL和1.083/1.090/1.110 g/mL) 进行密度梯度离心.
- 免疫磁性隔离 (负和正选择).
- 功能测试包括NETosis和氧化爆裂测试.
主要成果:
- 菲科尔的1.077/1.119 g/mL密度梯度方法为骨髓中性粒细胞分离提供了最佳的纯度/产量/活力/成本比.
- 建议使用Dynabeads进行免疫阳性选择,以隔离来自脏的中性粒细胞.
结论:
- 针对小鼠中性粒细胞,根据来源组织 (骨髓与脏) 推采用特定的隔离方案.
- 优化中性粒细胞隔离对于推进先天性免疫和中性粒细胞相关疾病的研究至关重要.
