在异质细胞群中检测定义的T细胞克隆的协议
Andrea Gobbini1, Alessandra Bandera2, Renata Grifantini3
1INGM, Istituto Nazionale Genetica Molecolare "Romeo ed Enrica Invernizzi", 20122 Milan, Italy.
STAR protocols
|December 23, 2023
概括
这项研究引入了一项新协议,用于在复杂细胞混合物中识别特定的T细胞克隆. 该方法使用T细胞受体测序来检测预定义的克隆,有助于表型和功能分析.
科学领域:
- 免疫学 免疫学 免疫学
- 分子生物学分子生物学
背景情况:
- 识别特定的T细胞克隆对于了解它们在免疫反应中的作用至关重要.
- 多克隆性T细胞种群对隔离和特征化个体克隆提出了挑战.
研究的目的:
- 为在异质细胞群中检测预定义的T细胞克隆提出详细的协议.
- 通过隔离特定的克隆,使T细胞表型和功能的表征成为可能.
主要方法:
- 从血液中分离人类CD4+ T细胞.
- 抗原刺激和光激活细胞分类 (FACS) 来分离抗原特异性细胞.
- 使用5'-RACE (TCR-SMART) 进行T细胞受体 (TCR) cDNA放大,然后进行定量PCR (qPCR) 检测.
主要成果:
- 该协议成功地使预定义的T细胞克隆在排序的抗原特异性T细胞群体内被检测出来.
- 这种方法可以根据其独特的TCR序列识别特定的T细胞克隆.
结论:
- 开发的协议提供了一种强大的方法来识别定义的T细胞克隆.
- 这种技术对于免疫学研究有价值,需要精确的T细胞克隆特征.


