评估替代宿主对还原性脱酶的重组表达的评估
Rabeya Rahmatullah1, Christopher P Marquis1
1School of Biotechnology and Biomolecular Sciences, The University of NSW, Sydney, NSW 2052 Australia.
Enzyme and microbial technology
|December 26, 2023
概括
这项研究的重点是产生功能性重组TmrA,这是一种减少性脱酶酶,对于分解有毒的甲至关重要. 研究人员成功地在几种细菌宿主中产生了活性TmrA,为有机化物污染物的生物修复提供了一种有希望的方法.
科学领域:
- 环境微生物学 环境微生物学
- 生物修复是一种生物修复.
- 酶工程是什么? 酶工程是什么?
背景情况:
- 有机化物是一种持久性,有毒的环境污染物.
- 有机化物呼吸细菌 (OHRB) 使用降解脱酶 (RDases) 来排毒有机化物.
- 微生物降解脱是一种有前途的生物修复策略.
研究的目的:
- 开发用于产生功能性重组TmrA的策略,这是来自Dehalobacter sp.的RDase. 联合国南北水域卫生局.
- 调查TmrA在 (CF) 转化为二甲 (DCM) 的作用.
- 优化TmrA在各种微生物宿主中的表达和活性.
主要方法:
- 在大肠杆菌中表达TmrA,从纳入体中回收,并用FeCl3,Na2S和可巴胺重新折叠.
- 分数实验设计用于培养和诱导,在无氧条件下进行净化.
- 在Shimwellia blattae和Cupriavidus necator H16中表达TmrA,伴随着和没有伴侣蛋白的共同表达以及带有/没有TAT信号.
主要成果:
- 功能性TmrA从包含体中恢复并重新折叠.
- 与之前的报告相比,重组和原生TmrA的活性显著提高.
- 在S. blattae和C. necator H16.中成功地以可溶和活性形式表达了TmrA.
- 从TmrA中去除TAT信号增加了S. blattae.中的脱活动.
结论:
- 优化的表达和重新折叠策略产生了高度活跃的重组TmrA.
- 像S. blattae和C. necator H16这样的新宿主适合表达功能性RDases.
- 这项工作推进了微生物还原性脱的潜力,用于清除有机的环境.
