EtOH-LN冷嵌入工作流程,以最大限度地减少冷组织中的冷文物:在准备与基于质谱的空间蛋白质组学应用相容的组织的试点研究
Yong Chiang Tan1, Muaatamarulain Mustangin2, Nurwahyuna Rosli2
1School of Postgraduate Studies, International Medical University, Kuala Lumpur, Malaysia.
Cryobiology
|December 29, 2023
概括
我们探索了使用乙醇与液 (LN) 进行冷嵌入组织的方法. 这种更安全的EtOH-LN方法减少了结工件,并改善了空间蛋白质学的一致性,尽管分子影响需要进一步研究.
科学领域:
- 生物技术是生物技术.
- 蛋白质组学是指蛋白质组学.
- 组织病理学 组织病理学
背景情况:
- 液 (LN) 快速结对于在空间蛋白质组学中保存组织形态至关重要.
- 目前用于LN冷的冷却剂对健康构成风险,而且成本高昂.
- 需要更安全,更容易获得的替代品,用于冷嵌入组织.
研究的目的:
- 引入和评估一个乙醇-液 (EtOH-LN) 工作流程,作为一个更安全的替代冷却剂,用于冷嵌入冷组织.
- 评估EtOH-LN在空间蛋白质组学中保存组织形态的可行性.
- 为了比较EtOH-LN与现有方法在减少冷文物中的有效性.
主要方法:
- 开发了一种EtOH-LN工作流程,使用95%的乙醇作为基于LN的冷却液.
- 在使用EtOH-LN,LN-only和冷静态方法冷嵌入的组织中比较冷工件.
- 修改了一种形态恢复技术,以适应EtOH-LN的工作流.
主要成果:
- 无论是EtOH-LN还是LN-only的工作流程,与冷器嵌入相比,冷工件显著减少 (p < 0.005).
- EtOH-LN的工作流显示出比LN-only (SD = 1.29) 更大的一致性 (SD = 0.56).
- 通过适应形态恢复方法,成功地使用EtOH-LN工作流 (p <0.05) 从冷文物中恢复了组织架构.
结论:
- 与LN-only方法相比,EtOH-LN工作流是冷嵌入冷组织的可行,更安全和更一致的替代方案.
- 这种工作流有效地保留了组织形态,减少了空间蛋白质组学应用的结工件.
- 需要进一步的研究来证实EtOH-LN工作流对组织分子形状的影响.
