准备样本用于哺乳动物细胞的实地冷图
Noah Weber1, Brennan Hinks2, Jacob Jensen3
1College of Liberal Arts, University of Minnesota; Department of Biochemistry, Molecular Biology and Biophysics, Medical School, University of Minnesota.
Journal of visualized experiments : JoVE
|January 1, 2024
概括
准备样本用于in situ细胞冷图是具有挑战性的,但可以实现的. 本指南提供了实用技巧,用于高质量的成像附着哺乳动物细胞在他们的原生状态.
科学领域:
- 细胞生物学和病毒学
- 相对和整合成像成像是相对和整合成像.
- 低温电子显微镜技术的技术
背景情况:
- 在现场细胞冷学使得研究细胞在它们的原生,冷-水合状态.
- 它通过与其他显微镜方法相结合,对整合性和相关性成像非常有价值.
- 目前的局限性包括粘附细胞样本准备的困难和电网脆弱性.
研究的目的:
- 为在现场细胞冷图学准备样本的常见挑战提供实际解决方案.
- 为了实现对附着哺乳动物细胞的高质量成像,进行相关研究.
- 促进冷图学在细胞生物学和病毒学研究中的应用.
主要方法:
- 详细描述了改善细胞附着和拉伸在电子显微镜网上的技术.
- 对脆弱的网格进行温和处理以防止断裂的策略.
- 在样本处理过程中应对组织培养皿几何形状所带来的挑战的方法.
主要成果:
- 成功地准备了优质样本,用于粘附哺乳动物细胞的现场细胞冷图.
- 证明克服常见的样本准备障碍.
- 能够在细胞的原生环境中对细胞进行相关成像.
结论:
- 描述的技巧和技巧显著改善了在现场细胞冷图的样品准备.
- 这种技术与冷显微镜的进步相结合,有望提高对复杂生物系统的理解.
- 在高分辨率下对细胞和病毒进行详细的结构分析.


