一种光拼接切换鼠标模型能够高通量,灵敏量化反感性寡核酸输送和活性
Amy E Byrnes1, Filip Roudnicky2, Alvin Gogineni3
1Department of Neuroscience, Genentech, Inc., South San Francisco, CA 94080, USA.
Cell reports methods
|January 3, 2024
概括
研究人员开发了一种新的双光小鼠模型,以追踪反感性寡核酸 (ASO) 的输送和活体中的活性. 这种工具可以精确测量ASO在不同细胞类型和器官中的分布和有效性,从而推进ASO治疗方法.
科学领域:
- 分子生物学分子生物学
- 药理学 药理学是指药理学的学科.
- 遗传学 遗传学 是一个
背景情况:
- 反感性寡核酸 (ASOs) 是有前途的治疗药物,但它们的临床发展受到评估体内输送和活性方面的挑战的限制.
- 需要准确的方法来量化ASO生物分布和特定细胞类型和器官中的目标参与.
研究的目的:
- 开发和验证一种新的双光,鼠模型,用于实时监测反感性寡核酸 (ASO) 交付和活体活性.
- 为了能够对ASO在不同细胞类型和器官中的药理动力学进行定量评估.
主要方法:
- 开发一个表达mKate2的敲击鼠标模型和对ASO诱导的拼接敏感的工程EGFP记者.
- 在中枢神经系统 (CNS) 细胞类型中注射ASO以评估大脑输送和EGFP拼接切换动力学.
- 静脉注射 (IV) ASO载脂纳米颗粒 (LNPs),以评估肝脏输送和细胞特异性活性.
- 使用光激活细胞分类 (FACS) 来分离表达EGFP的细胞.
主要成果:
- 在ICV注射后,在主要的中枢神经系统 (CNS) 细胞类型中证明了ASO度和时间依赖的EGFP拼接切换.
- 在IV注射ASO载荷的LNP后,在肝脏中观察到强大的EGFP表达.
- 成功地从肝脏中分离出EGFP阳性细胞,证实有效的ASO输送和活性.
结论:
- 开发的双光小鼠模型为量化细胞类型和器官特定的ASO输送和活体活性提供了强大的工具.
- 该模型促进了ASO输送策略的优化,并支持ASO治疗方法的发展,用于各种疾病征兆.
