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Updated: Jul 6, 2025
13:51
The MultiBac Protein Complex Production Platform at the EMBL
Published on: July 11, 2013
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使用Cre/lox和Dre/rox特定站点重组系统构建和应用一个多功能CHO细胞平台
Chen Zhang1, Feng Chang1, Hui Miao1
1State Key Laboratory of Bioreactor Engineering, School of Biotechnology, East China University of Science and Technology, Shanghai, China.
Frontiers in bioengineering and biotechnology
|January 4, 2024
概括
一个新的CDbox系统可以在中国仓鼠卵巢 (CHO) 细胞中实现特定基因的集成,从而提高蛋白质生产的稳定性和效率. 这个平台加速了生物制药高产细胞系的开发.
科学领域:
- 生物技术是生物技术.
- 分子生物学分子生物学
- 细胞线发展发展 细胞线发展
背景情况:
- 传统的中国仓鼠卵巢 (CHO) 细胞系的发展依赖于随机基因整合,导致无法预测的生产率和昂贵的查.
- 特定站点的集成提供了一个解决方案,以提高CHO电池的生产稳定性和一致的产量.
研究的目的:
- 开发一种多功能平台,用于在CHO细胞中进行特定位点的基因集成.
- 为了证明开发的蛋白质生产平台的效率和稳定性.
主要方法:
- 多功能CDbox表达卡塞特的设计和实施.
- 通过CRISPR/Cas9技术将CD盒卡塞特插入CHO-K1 H11位置.
- 基因操纵和交换的Cre/lox和Dre/rox特定地点重组系统.
主要成果:
- 成功生成了一个符合CHO-CDbox电池平台.
- 通过Cre/lox介导的磁带交换,EGFP的快速 (2周) 和稳定的表达,在没有药物选择的情况下维持超过75代.
- 使用Dre/rox系统证明EGFP基因消除.
- 通过快速构建Pembrolizumab抗体稳定表达菌株和表面显示/分泌抗体的整合来显示实际应用.
结论:
- CHO-CDbox细胞平台提供了一个强大而灵活的系统,用于在CHO细胞中进行特定位点的基因集成.
- 这一平台显著提高了开发高产细胞系的效率和稳定性.
- 开发的系统为生物制药蛋白生产和基因功能研究提供了超出单基因插入的扩展适用性.
