在多发性骨髓瘤患者样本中,通过LC-MS破译内源性可溶性B细胞成熟抗原的确切序列和公正量化

科学领域:

• 生物化学 生物化学
• 分析化学 分析化学
• 在瘤学瘤学.

背景情况:

• B细胞成熟抗原 (BCMA) 是多发性骨髓瘤 (MM) 的关键治疗点.
• 溶性BCMA (sBCMA),从膜结合的BCMA中脱落,作为生物标志物,可以干扰治疗.
• 目前用于测量sBCMA的ELISA和IA-LC-MRM等方法受到抗体偏差的限制.

研究的目的:

• 使用先进的LC-MS工作流程,在MM患者样本中表征和量化内源性sBCMA.
• 通过定义其确切序列,建立一个无偏见的sBCMA量化方法.
• 将一种新方法的性能与现有的基于抗体的测试进行比较.

主要方法:

• 利用各种液态染色体质谱法 (LC-MS) 方法,包括自下而上的图和完整分析.
• 开发了一种无试剂 (RF) -LC-MRM测定,该测定基于内源性sBCMA (G-1-61) 的确定序列.
• 量化了MM患者样本中的sBCMA,并将结果与ELISA和基于抗体的IA-LC-MRM进行了比较.

主要成果:

• 确认了内源性sBCMA的可变N端和以氨基酸61结束的C端.
• 开发的RF-LC-MRM方法证明了对sBCMA的不偏见量化.
• 与抗体依赖方法相比,RF-LC-MRM捕获了一个更全面的sBCMA池.

结论:

• 这项研究提供了第一个固有的sBCMA的最终序列,与商业标准不同.
• 准确的序列鉴定对于可靠的生物分析测量和sBCMA的药学动力学评估至关重要.
• 在MM研究和临床环境中,RF-LC-MRM方法为测量sBCMA提供了更准确的方法.