基于LC-MS的方法的比较,用于在动物基质中确定碳素酸
Heidi E Schwartz-Zimmermann1,2, Manuel Hündler3,4,5, Nicole Reiterer3,4,6
1Department of Agrobiotechnology, IFA-Tulln, Institute of Bioanalytics and Agro-Metabolomics, University of Natural Resources and Life Sciences, Vienna (BOKU), Tulln, Austria. heidi.schwartz@boku.ac.at.
Analytical and bioanalytical chemistry
|January 4, 2024
概括
建议使用3-Nitrophenylhydrazine (3-NPH) 衍生来量化动物样本中的碳酸 (CA),使用逆相液态染色学-并联质谱法 (RP-LC-MS/MS). 氨酸衍生显示出较低的回收率和不准确的量化,使其不适合这些分析.
科学领域:
- 分析化学 分析化学
- 代谢学 代谢学 代谢学
- 动物科学动物科学
背景情况:
- 碳素酸 (CA) 是动物生理学中至关重要的代谢物.
- 标准的逆相液态染色学 (RP-LC) 努力保留本地CA.
- 衍生增强CA的检测能力和色谱行为.
研究的目的:
- 为了比较氨酸和3 - 尼托基氨酸 (3-NPH) 衍生方法来量化动物矩阵中的CA.
- 为了评估方法的性能,关于衍生效率,回收和准确性.
- 确定每个方法在牛便和反动物液中分析CA的适用性.
主要方法:
- 开发了两种RP-LC双重质谱法 (RP-LC-MS/MS),使用氨酸或3-NPH作为衍生剂.
- 与高分辨率质谱学 (AIC-HR-MS) 结合的离子交换染色学被用作参考方法.
- 通过使用C标记的内部标准评估衍生完整性,明显恢复 (RAs) 和量化CA度.
主要成果:
- 3-NPH衍生实现了接近100%的效率和平均RAs的~100%.
- 氨酸衍生显示了可变效率 (20-100%) 和低平均RAs (~45%).
- 使用3-NPH的量化结果与AIC-HR-MS参考方法相当,而氨酸衍生物化低估了CA度的5倍.
结论:
- 3-NPH导化是一种可靠和准确的方法,通过RP-LC-MS/MS来量化牛便和反液中的碳酸.
- 由于性能差,不建议对动物样本中的CA进行定量分析.
- 在动物代谢研究中,准确的CA量化需要适当的衍生策略.


