RLP系统:采用单管两步方法,采用双放大级联来快速识别EGFR T790M
Tao Huang1, Yanxi Han1, Yuqing Chen1
1National Center for Clinical Laboratories, Institute of Geriatric Medicine, Chinese Academy of Medical Sciences, Beijing Hospital/National Center of Gerontology, China; National Center for Clinical Laboratories, Chinese Academy of Medical Sciences & Peking Union Medical College, Beijing, China; Beijing Engineering Research Center of Laboratory Medicine, Beijing Hospital, Beijing, China.
Analytica chimica acta
|January 5, 2024
概括
一个新的生物传感平台,RLP,通过抑制野生类型序列,使得在生物流体中高度敏感地检测癌症突变. 这种快速,具有成本效益的方法推进了精密医学和液体活检诊断.
科学领域:
- 生物技术是生物技术.
- 分子诊断学 分子诊断学
- 基因组学就是基因组学.
背景情况:
- 液体活检通过检测生物流体中的突变来彻底改变癌症诊断.
- 检测低丰富的瘤突变是具有挑战性的,因为高野生类型的背景.
- 在不影响突变检测的情况下选择性抑制野生类型序列至关重要.
研究的目的:
- 开发一种高度敏感和选择性的方法来检测生物流体中的癌症基因突变.
- 为了克服液体活检中野生类型背景干扰的挑战.
- 为准确医学创建一个快速,经济高效的诊断工具.
主要方法:
- 开发了一种复合酶辅助的锁定核酸 (LNA) 探针介导的双放大生物传感平台 (RLP).
- 组合复合酶聚合酶放大 (RPA) 和LNAPCR在一个单管中.
- 利用LNA探针对野生类型序列进行选择性抑制和突变序列的放大.
主要成果:
- 在45分钟内,RLP实现了单拷贝水平的DNA量化,并检测到突变的基分数低至0.007%.
- 该系统在EGFR T790M突变检测方面表现出高灵敏度和选择性.
- 通过RLP,可直接检测血样本,将成本降至每次检测不到1美元,并消除交叉污染风险.
结论:
- RLP系统有效地抑制野生类型序列,使生物流体中敏感的突变物检测成为可能.
- 它与LNA探针的灵活性允许检测各种基因突变.
- RLP为推进精密医学和液体活检提供了灵敏,快速,经济高效和可靠的解决方案.
