使用向LC-MS/MS方法对基于新抗原的产品的抗原呈现能力的表征
Nan Xiang1, Kehua Zhang2, Yinghua Zhao3
1College of Life Sciences, University of Chinese Academy of Sciences, Beijing 100049, China; The Cell Collection and Research Center, National Institutes for Food and Drug Control, No. 31 Huatuo St., Daxing District, Beijing, China.
Journal of pharmaceutical and biomedical analysis
|January 7, 2024
概括
我们开发了一种敏感的质谱法,可以直接评估新抗原产品中的抗原呈现. 这种技术通过克服以前方法的灵敏度限制,提高了质量控制.
科学领域:
- 免疫学 免疫学 免疫学
- 分析化学 分析化学
- 生物技术是生物技术.
背景情况:
- 基于新抗原的产品需要强大的免疫反应评估.
- 抗原呈现细胞 (APC) 呈现抗原对于免疫反应至关重要.
- 目前对T细胞功能的生物测试有局限性.
- 质谱 (MS) 为分析 APC 提供了潜在的优势,但面临着敏感性挑战.
研究的目的:
- 开发和验证一种高度敏感的向液体染色学-并联质谱法 (LC-MS/MS) 方法.
- 为了实现抗原呈现的直接表征,用于基于新抗原的产品的质量控制.
- 在基于MS的APC分析中克服灵敏度限制.
主要方法:
- 针对短的优化提取参数.
- 使用超高性能液态染色学 (UHPLC) 的高度敏感的向三重四极体MS.
- 利用选择性离子监测 (多重反应监测,MRM) 和实施质量控制.
- 根据ICH Q2 (R2) 和M10指南验证了该方法.
主要成果:
- 开发并验证了一种敏感的LC-MS/MS方法用于抗原呈现特征.
- 通过在不同APC中使用质量控制来证明强度和可靠性.
- 在选择性,特异性,灵敏性,LOD,回收,矩阵效应和可重复性方面取得了令人满意的验证结果.
- 在基于新抗原的产品中,成功地将该方法应用于树突细胞 (DCs).
结论:
- 开发的有针对性的LC-MS/MS方法为基于新抗原的产品的质量控制提供了一种敏感而强大的方法.
- 这种方法直接评估了APC的抗原呈现能力,补充了传统的T细胞测定.
- 与T细胞检测的整合提供了从物理化学和生物方面的细胞产品质量的全面评估.
