鉴定和演变的非传统的酸酶来自Spirosoma linguale DSM 74具有高水化活性
Yangyang Sun1, Zhuzhu Tang1, Yanjun Li1
1State Key Laboratory of Bioreactor Engineering, New World Institute of Biotechnology, East China University of Science and Technology, Shanghai 200237, China.
Bioorganic chemistry
|January 7, 2024
概括
研究人员设计了化酶酶,以改善胺的生产. 一种新的酸酶变体,T191S,显著增强了水合活性,克服了先前在胺合成中的限制.
科学领域:
- 生物催化剂是一种生物催化剂.
- 酵素工程是什么意思 酵素工程
- 合成生物学 合成生物学
背景情况:
- 通过化酶的化为胺基生产提供了一条新的途径.
- 目前的化酶水化活性往往很低,或遭受与催化效率的权衡,限制工业应用.
研究的目的:
- 识别和设计具有增强水活性的化酶,以实现高效的胺合成.
- 为了克服低化活性和化酶介导的胺生产中的活性-催化权衡的局限性.
主要方法:
- 选一个公共数据库,寻找自然存在的C端截断化酶.
- 通过对硬质障碍的分析来确定关键残留物 (I166,W168,T191).
- 在已识别的关键残留物上进行和突变发生,以产生改进的变体.
主要成果:
- 来自Spirosoma linguale DSM 74的Nitrilase Nit-74显示出高水活性 (50.7%的尼古丁胺胺形成).
- 突变T191S实现了显著改善的水分活动 (72.7%的尼古丁胺胺形成),超过了以前的记录.
- 突变I166N和W168Y产生具有高特异性的胺 (分别为97.5%和97.7%),而不会影响催化活性.
结论:
- 工程化酶,特别是T191S,在胺基生产方面表现出优异的水化活性.
- 鉴定到的关键残留物和突变发生策略有效地提高了化酶水化效率.
- 这些发现为工业化胺合成提供了多变性利酶的宝贵库.


