在Burkholderia细菌宿主中通过等离子体复制号工程生产高产率的拉索
Hannah N Fernandez1, Ashley M Kretsch2, Sylvia Kunakom1
1Department of Pharmaceutical Sciences and Center for Biomolecular Sciences, College of Pharmacy, University of Illinois at Chicago, Chicago, Illinois 60607, United States.
ACS synthetic biology
|January 9, 2024
概括
这项研究增强了Burkholderia sp.中的拉索产量. FERM BP-3421通过增加等离子体副本数量,实现1000倍更高的产量. 这一突破有助于拉索的发现和开发用于治疗应用.
科学领域:
- 生物技术是生物技术.
- 微生物学 微生物学
- 药物发现 药物发现 药物发现
背景情况:
- 拉索提供了增强的稳定性,但产量低,限制了它们的治疗潜力.
- 伯克霍尔迪亚 sp. 的种类. 鉴定出FERM BP-3421是拉索生产的主体,之前已经注意到过度生产者克隆.
研究的目的:
- 调查导致Burkholderia sp.过度生产者表型的因素. 在FERM BP-3421.1.
- 为了优化拉索生产产量,并验证宿主用于新的拉索发现.
主要方法:
- 在Burkholderia sp.中调节性等离子体的复制号码. 在FERM BP-3421中,增加了Capistruin的产量.
- 将开发的工具应用于Mycetohabitans sp.的新拉索基因集群. B13. B13. B13. B13. B13. B13. B13. B13. B13. B13. B13.
主要成果:
- 增加的等离子体拷贝数部分解释了过度生产者的表型,导致平均标位比原来的过度生产者高160%.
- 达到高达240mg/L的产量标位,比以往基于大肠杆菌的方法提高了1000倍.
- 成功分离了新的拉索,mycetolassin-15和mycetolassin-18,其联合标位为11 mg/L.
结论:
- 伯克霍尔迪亚 sp. 的种类. FERM BP-3421已被验证为高产率拉索发现的有效生产平台.
- 开发的工具和优化的生产系统显著提高了开发基于拉索的治疗方法的可行性.
