在Drosophila中使用亚细胞向的GCaMP8f进行突触区的Ca2+成像
Jiawen Chen1, Kaikai He1, Yifu Han1
1Department of Neurobiology, University of Southern California, Los Angeles, CA 90089, USA.
STAR protocols
|January 10, 2024
概括
这项研究详细介绍了使用GCaMP8f指标在Drosophila神经肌肉结处进行 (Ca2+) 成像的协议. 该方法允许可视化神经元活动在前和后突触部位.
科学领域:
- 神经科学是一个神经科学.
- 分子生物学分子生物学
- 遗传学 是一个遗传学.
背景情况:
- 基因编码的指标 (GECI) 对于监测神经元活动至关重要.
- GCaMP8f为检测动态提供了高灵敏度.
- 德洛索菲拉神经肌肉结 (NMJ) 是研究突触传输的一个强大的模型系统.
研究的目的:
- 提出使用GCaMP8f.在Drosophila NMJ进行Ca2+成像的详细方案.
- 为了使神经元活动在前和后突触区的可视化.
- 描述突触传输事件期间的Ca2+动态.
主要方法:
- 利用GCaMP8f通过与synaptotagmin和mScarlet的融合准了前突触终端,用于比度成像.
- 采用GCaMP8f与PDZ结合动机融合,用于后突触准图像微型传输事件.
- 在Drosophila melanogaster神经肌肉结处进行了Ca2+成像.
主要成果:
- 成功证明了前突触终端活动的比度Ca2+成像.
- 通过后突触GCaMP8f.启用了微型突触传输事件的"量子"成像.
- 在Drosophila NMJ提供了基于GCaMP8f的Ca2+成像的综合性协议.
结论:
- GCaMP8f是一种多功能工具,用于研究Drosophila NMJ中的Ca2+信号.
- 提出的协议有助于详细分析前突触和后突触神经元活动.
- 这种方法促进了研究突触功能和活体可塑性的研究.
