LC-ESI-HRMS - 脂的脂组学:提取的特征,色谱和检测参数
Katharina M Rund1, Laura Carpanedo1, Robin Lauterbach1
1Chair of Food Chemistry, Faculty of Mathematics and Natural Sciences, University of Wuppertal, Gaussstr. 20, 42119, Wuppertal, Germany.
优化液体染色学-并联质谱学 (LC-MS/MS) 增强了极性脂质的量化. n3-PUFA补充剂改变了人体血中的脂样本,增加了含有20:5的脂质,减少了含有22:4的脂质.
科学领域:
- 分析化学 分析化学
- 生物化学 生物化学
- 代谢学 代谢学 代谢学
背景情况:
- 脂质对生物功能至关重要,如细胞信号传递和膜结构.
- 脂质学,特别是LC-MS/MS,对于分析脂质资料至关重要.
- 优化LC-MS/MS方法对于准确的极性脂质半量化至关重要.
研究的目的:
- 为了优化液体染色学-并联质谱学 (LC-MS/MS) 设置用于极性脂质的半量化.
- 为了研究n3-多不和脂肪酸 (n3-PUFA) 补充剂对人类等离子体脂模式的影响.
主要方法:
- 使用一个Q Exactive HF质谱仪在全MS/数据依赖的MS2 TOP N模式.
- 采用CSH C18反相柱,具有28分钟的化窗口,用于极性脂质分离.
- 优化了MS源设置,样品制备 (MeOH/MTBE液体-液体提取),并在正负电离模式下进行分析.
主要成果:
- 与默认设置相比,优化的MS源设置将信号强度提高了三倍.
- 通过MeOH/MTBE液液提取,实现了优异的提取回收 (>85%) 和低变化率 (<15%).
- 在n3-PUFA补充后观察到脂样中的显著变化,含20:5脂质增加,含22:4脂质减少.
结论:
- 优化的LC-MS/MS方法为极性脂质半量化提供了更高的灵敏度和准确性.
- 补充n3-PUFA可证明改变了人体血中脂的概况.
- 像LPC 20:5_0:0和PC 16:0_20:5这样的特定脂质升高,而PE 18:0_22:4和PC 18:2_18:2则下降,证实了该方法的有效性.
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