对抗原表达的流动细胞计检测的标准化
Linhua Tian1, Aaron R Nelson2, Tyler Lowe2
1Biosystems and Biomaterials Division, National Institute of Standards and Technology (NIST), Gaithersburg, Maryland, USA.
Cytometry. Part B, Clinical cytometry
|January 13, 2024
概括
准确的抗原量化对于基于抗原的免疫治疗反应至关重要. 这项研究开发了一种使用对照细胞的标准化试验,证明定制抗体制剂和CD4参考改善了实验室和仪器之间的可重复性.
科学领域:
- 免疫学 免疫学 免疫学
- 生物技术是生物技术.
- 临床检测 临床检测
背景情况:
- 基于抗原的免疫疗法的有效性取决于瘤抗原表达水平.
- 对于临床应用,需要标准化和可重复的抗原量化试验.
- 现有的方法在不同的实验室和仪器平台中显示出变化.
研究的目的:
- 开发和验证可复制的抗原量化试验,用于临床使用.
- 评估影响抗原量化变异性的因素,包括抗体选择和校准方法.
- 为实验室间和细胞计间标准化建立质量控制措施.
主要方法:
- 使用了CytotrolTM冷控制细胞,用于在2个实验室的4个仪器平台上进行标准化.
- 评估了抗体克隆,定制与现成抗体 (1: 1 摩尔比) 和校准方法 (QuantiBrite PE 与线性) 的影响.
- 采用CD4作为单点尺度转换的参考标记,以最大限度地减少变化.
主要成果:
- 解冷化的对照细胞使流动细胞计平台和实验室之间的可重复性得到验证.
- 建议定制的1: 1单极抗体制剂用于确定抗原表达的测量,而不是现成的选择.
- 几何平均光强度 (GeoMFI) 不能在各种仪器中进行比较;作为参考,CD4最小化了ABC值的变化.
结论:
- 标准化抗原量化对于进行基于抗原的免疫治疗的患者的管理至关重要.
- 实施质量控制方法,包括冷解细胞控制,对于测试可重复性和临床验证至关重要.
- 定制抗体制剂和CD4参考标记增强了抗原量化试验的可靠性.
