通过新型表位导向单克隆抗体检测出多种循环形式的 neprilysin
Samantha S M Ling1, Shera Lilyanna1, Jessica Y X Ng1
1Cardiovascular Research Institute, Department of Medicine, Yong Loo Lin School of Medicine, National University of Singapore, National University Health System, 14 Medical Drive, Singapore, 117599, Singapore.
Cellular and molecular life sciences : CMLS
|January 13, 2024
概括
新的 neprilysin (NEP) 的单克隆抗体 (mAbs) 提高了 ELISA 的准确性. 这些验证的抗体揭示了NEP.
科学领域:
- 生物化学 生物化学
- 免疫学 免疫学 免疫学
- 心血管研究研究心血管研究
背景情况:
- 尼普里林素 (NEP) 是一种用于心力衰竭 (HF) 等疾病的生物标志物.
- 商业ELISA套件显示不一致的NEP测量,原因是抗体的特征不佳.
- 验证的抗体对于准确的NEP免疫测试数据至关重要.
研究的目的:
- 开发和验证单克隆抗体 (mAbs) 针对不同的 neprilysin (NEP) 表位.
- 建立可靠的NEP ELISA测定方法,以提高诊断准确度.
- 调查循环NEP在健康和心力衰竭中的异质性.
主要方法:
- 在的表位预测和选择用于mAb生成.
- 使用表面等离子体共振,西部抹影和表位图绘制对mAbs的表征.
- 开发一个双部位的三明治NEP ELISA试验.
- 西方分析了来自健康和HF患者的血NEP.
主要成果:
- 开发了一种经过验证的NEP ELISA,具有高灵敏度 (2.15 pg/ml LOD) 和广泛的工作范围 (13.1-8000 pg/ml).
- 在血中确定了NEP异质性,包括商业多克隆抗体无法检测到的~33kDa片段.
- 证明不同的抗体对检测出不同的NEP表位,解释了测试变异性.
- 观察到mAbs对各种NEP目标的差异性亲和力.
结论:
- 经验证的mAbs提供了更准确的循环 neprilysin (NEP) 的评估.
- 测试NEP测量的变异性是由表位特异抗体结合解释的.
- 了解NEP异质性是心力衰竭和其他疾病可靠生物标志物开发的关键.
