单细胞和两极化的M1/M2巨细胞从人类诱导的多能干细胞分化
Tea Soon Park1, Rishabh Hirday1, Russell Quinn1
1Ocular Stem Cells and Translational Research (OSCTR) Section, Ophthalmic Genetic and Visual Function Branch (OGVFB), National Eye Institute, National Institutes of Health, Bethesda, MD 20892, USA.
STAR protocols
|January 14, 2024
概括
这项研究详细介绍了从诱导多能干细胞 (iPSC) 生成单细胞的协议,创建了一个"单细胞工厂". 然后,这些细胞可以分化为M1/M2巨细胞,帮助研究各种细胞类型.
科学领域:
- 干细胞生物学 干细胞生物学
- 血液形成 血液形成 血液形成
- 免疫学 免疫学 免疫学
背景情况:
- 诱导多能干细胞 (iPSCs) 为产生各种细胞类型提供了可再生来源.
- 造血原始体对于血细胞发育至关重要.
- 单细胞和巨细胞在免疫和炎症中起着关键作用.
研究的目的:
- 建立一个可复制的协议,将iPSC分化为功能单细胞.
- 创建一种可扩展的单细胞生产方法 ("单细胞工厂").
- 为研究进一步分化为两极化的M1和M2巨细胞.
主要方法:
- iPSC 的扩张和胚胎体 (EB) 的形成.
- 悬浮培养EBs,然后对附着的造血原始体进行涂层.
- 从培养基中采集CD14+CD45+单细胞.
- 单细胞的冷保存和解.
- 单细胞分化为M1和M2巨细胞.
主要成果:
- 成功地将iPSCs分化为附着的造血原始体.
- 从这些原始细胞中持续释放CD14+CD45+单细胞.
- 有能力结和解单细胞,同时保持生命力.
- 单细胞成功分化为M1和M2巨细胞亚型.
结论:
- 提出的协议提供了一个强大的方法来产生iPSC衍生的单细胞.
- 这种"单细胞工厂"的方法有助于研究单细胞及其后代,包括巨细胞,微质细胞和树突细胞.
- 该协议作为研究基于iPSC的细胞疗法和疾病建模的基础.
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