KIT-SNAP-tag/细胞膜色谱模型与液体色谱-质谱相结合,用于从Evodia rutaecarpa中选抗GIST化合物

科学领域:

• 生物化学 生物化学
• 药理学 药理学是指药理学的学科.
• 传统中国医药 传统中国医药

背景情况:

• 胃肠介质瘤 (GIMTs) 是常见的,并使用铁激酶抑制剂 (TKIs) 治疗,如伊马替尼.
• 药物耐药性和复杂的监测限制了目前GIMTs的TKI疗法.
• 激素激酶 (KIT) 或血小板衍生的生长因子受体α的突变驱动GIMT的发病,是关键的药物标.

研究的目的:

• 开发一种用于选针对GIMT治疗中KIT受体的传统中医药 (TCM) 化合物的新方法.
• 为了从TCM中识别潜在的KIT向性抗瘤剂Evodia rutaecarpa.

主要方法:

• 使用SNAP标签技术制备一个KIT-SNAP标签细胞膜染色学 (KIT-SNAP-tag/CMC) 列.
• 将KIT-SNAP-tag/CMC与高性能液体染色学质谱学 (HPLC-MS) 结合起来,用于二维选系统.
• 使用非线性色谱测定结合亲和力 (K_D) 和甲基 thiazolyl tetrazolium (MTT) 测定细胞增殖抑制的化合物活性的验证.

主要成果:

• 基特-SNAP-tag/CMC-HPLC-MS系统在查方面表现出高的特异性,选择性和可重复性.
• 从Evodia rutaecarpa提取物中确定了三种潜在的KIT向化合物 - - 伏胺 (EVO),鲁特卡胺 (RUT) 和脱伏胺 (DEVO).
• EVO,RUT和DEVO对KIT受体表现出不同的结合亲和力,而EVO和RUT抑制了高KIT表达细胞的增殖.

结论:

• KIT-SNAP-tag/CMC系统是一个可靠的平台,用于从TCM等复杂混合物中选抗瘤化合物.
• 埃沃迪胺和鲁他卡是进一步开发的有希望的候选人,作为基因技术驱动的GIMT的向治疗方法.
• 这种方法有助于从天然产品中发现新的抗癌剂.