一个没有珀色的HIV-1原病毒的生物直角点击标签用于病毒内单分子成像
Yuanyun Ao1, Jonathan R Grover2, Levi Gifford3
1Department of Cellular and Molecular Biology, School of Medicine, University of Texas at Tyler Health Science Center, Tyler, TX 75708, USA.
Cell chemical biology
|January 17, 2024
概括
这项研究引入了一种无珀的HIV-1系统,用于对信封糖蛋白进行生物对等标记. 这种方法可以对HIV-1动态和细胞进入进行先进的单分子研究.
科学领域:
- 病毒学 病毒学
- 结构生物学 结构生物学
- 生物化学 生化学
背景情况:
- 人类免疫缺陷病毒1 (HIV-1) 包裹 (Env) 糖蛋白动态对于病毒进入和免疫逃避至关重要.
- 之前研究Env动态的方法,如标记或通过珀停止-codon抑制进行非正规氨基酸 (ncAA) 结合,具有包括潜在结构干扰或技术挑战在内的局限性.
- 在HIV-1中进行ncAA整合的珀停止编码抑制在技术上是困难的,因为病毒基因组中存在珀编码子.
研究的目的:
- 开发一个完好无珀的HIV-1系统,用于对Env糖蛋白进行微侵袭的生物对等标记.
- 为了使Env结构动态的先进单分子Förster共振能量转移 (smFRET) 研究成为可能.
- 实时跟踪单个HIV-1病毒内部化和细胞内的贩运.
主要方法:
- 开发一种没有珀的HIV-1系统,以克服先前存在的病毒珀子所带来的挑战.
- 将双重非正规氨基酸 (ncAAs) 纳入无珀病毒的Env糖蛋白.
- 使用点击化学进行Env的生物对等标记,然后进行单分子FRET (smFRET) 和活细胞成像.
主要成果:
- 在没有珀的HIV-1病毒中成功实现了对Env的双ncAA整合.
- 验证了Env结构动态的先前发现,证实了它使用smFRET采样多个构造状态的倾向.
- 启用了单个无珀点击标记的病毒内部化和细胞内贩运的实时跟踪.
结论:
- 开发的无珀系统允许在病毒中对病毒蛋白进行生物对等标记.
- 这种方法克服了与以前的HIV-1标签方法相关的技术障碍.
- 该系统与HIV-1入境,贩运和出境的先进研究兼容,为病毒病原性提供了新的见解.
关键词:
艾滋病病毒-1 艾滋病病毒-1珀色的抑制抑制没有珀的普罗维鲁斯.生物对等标签的标签然后点击化学.包裹中的葡萄糖蛋白质.遗传密码扩张 扩张单个病毒追踪 单个病毒追踪单分子FRETET是一种单分子FRET.单个分子成像技术更多相关视频
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