化学和物理剂对麻疹病毒传染性的影响和下游研究应用
Davide Mariotti1, Aurora Bettini1, Silvia Meschi1
1Laboratory of Virology and Biosafety Laboratories, National Institute for Infectious Diseases "Lazzaro Spallanzani" IRCCS, Via Portuense 292, 00149, Rome, Italy.
Virology
|January 20, 2024
概括
高温热处理 (70°C) 和紫外线辐射有效降低样本中病毒 (MPXV) 传染性标位. 然而,这些方法可能会影响下游分子检测试验,需要仔细考虑安全的样品处理.
科学领域:
- 病毒学 病毒学
- 传染性疾病 传染性疾病
- 生物安全 生物安全
背景情况:
- 2022年全球病毒 (MPXV) 爆发突显了对有效样本无活化方法的关键需求.
- 建立临床和研究样本的安全处理协议对于防止进一步传播至关重要.
研究的目的:
- 评估不同无活化方法在MPXV传染性标位上的有效性.
- 评估这些方法对MPXVDNA和蛋白质检测的影响.
主要方法:
- 用Triton X-100 (0.1-0.2%),UV-C辐射 (15-30分钟) 或热 (56°C30分钟或70°C5分钟) 处理MPXV样本.
- 使用TCID50测定法测量了传染性标位的降低.
- 对DNA检测的影响通过PCR (Ct值增加) 来评估.
- 对蛋白质检测的影响由ELISA评估.
主要成果:
- 在70°C的热处理显著降低了MPXV传染性标位 (5.4Log TCID50/mL).
- 紫外线照射和56°C热量也降低了标位 (分别为4.3和3.9Log),而Triton X-100的效率较低 (1.8-2.5Log).
- 紫外线增加了PCR Ct值 (2.2-4.3),表明干扰了DNA检测.
- 加热显著影响了基于ELISA的蛋白质检测.
结论:
- 紫外线照射和热处理对于减少MPXV传染性标位是有效的.
- 在选择无活化方法时,必须考虑其对分子诊断试验 (PCR,ELISA) 的潜在干扰.
- 优化安全处理程序对于MPXV研究和临床诊断至关重要.
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