通过定向进化改善酸酶BLk对有机溶剂的耐药性
Fucheng Zhu1, Zixu Yan1, Jingli Dai1
1College of Biological and Pharmaceutical Engineering, Anhui Engineering Laboratory for Conservation and Sustainable Utilization of Traditional Chinese Medicine Resources, Anhui Province Key Laboratory for Quality Evaluation and Improvement of Traditional Chinese Medicine, West Anhui University, Lu'an city 237012, China.
Journal of biotechnology
|January 20, 2024
概括
研究人员使用定向进化增强了角酶BLk的有机溶剂稳定性. 突变者在乙二和中显著改善了半衰期,在工业应用中保持了野生类型的活性.
科学领域:
- 生物化学 生物化学
- 酶学 是一种酶学.
- 蛋白质工程是指蛋白质工程.
背景情况:
- 氨酸酶对于氨酸水解至关重要,但对于工业用途而言需要增强稳定性.
- 以前的研究重点是热稳定性,但有机溶剂稳定性仍然是一个挑战.
研究的目的:
- 通过使用定向进化来改善Bacillus licheniformis keratinase (BLk) 的有机溶剂稳定性.
- 为了确定在有机溶剂中增强稳定性的突变.
主要方法:
- 使用定向进化来产生和选BLk突变体.
- 在各种有机溶剂 (乙二,) 中评估了酶稳定性.
- 进行了蛋白质分解活性和分子动力学模拟.
主要成果:
- 三种突变 (D41A,A24E,A24Q) 在50%的乙和中表现出显著增强的稳定性.
- 半衰期在酸中增加了63倍,在酸中增加了27倍.
- 突变位于酶表面,蛋白质分解活性与野生类型相似.
结论:
- 定向进化成功地提高了BLk的有机溶剂稳定性,而不会影响活性.
- 增加的分子内相互作用 (键,性) 可能有助于提高溶剂耐受性.
- 这些工程突变对工业应用具有前景,包括在有机溶剂中进行氨酸水解.
