工程人类H链费里丁与内腔的反向电荷表现出RNA介导的海绵状效应,用于加载RNA/DNA结合分子

科学领域:

• 生物化学 生化学
• 分子生物学分子生物学
• 生物技术是生物技术.

背景情况:

• 费里是一种球状蛋白质,具有能够封装化合物的内部腔.
• 原生费里腔具有负面电荷,限制了负电荷分子的负载,如siRNA.
• 基因工程可以修改费里的特性,用于新的应用.

研究的目的:

• 为高效的siRNA封装设计一个具有正电荷的内部腔体的人类H链费里丁.
• 为了研究工程化费里丁作为配送车辆的载荷能力和特性.
• 为了评估装载着多克索鲁比的工程费里丁的药物释放特征和细胞毒性.

主要方法:

• 人类H链费里丁的基因工程引入了阴离子RKRK域,逆转了腔体的电荷.
• 在大肠杆菌 (E. coli) 中产生复合费里.
• 将siRNA和多克索鲁比辛封装到工程化费里丁中.
• 在体外评估药物释放动力学和细胞毒性.

主要成果:

• 工程化费里呈现出反向的,正的内部电荷,使负电荷siRNA的有效封装成为可能.
• 装有细菌RNA的重组费里丁,充满了细菌RNA,作为一种RNA海绵,对核酸结合物质具有很高的亲和力.
• 通过RNA海绵载入的多克索鲁比显示持续释放和细胞毒性概况与自由药物相比.
• 与野生类型蛋白质相比,工程化费里丁显示出明显更高的负载效率.

结论:

• 这项研究报告了第一个具有修改内部空腔充电的费里/核酸混合输送车辆.
• 工程化费里作为核酸输送和持续药物释放的有效平台.
• 开发的系统具有广泛的生物医学应用潜力,包括有针对性的药物输送.