通过逆转录复合酶聚合酶放大试验快速检测猪病毒

科学领域:

• 兽医病毒学 兽医病毒学
• 分子诊断学 分子诊断学
• 异热放大技术 异热放大技术

背景情况:

• 猪萨佩洛病毒 (PSV) 是一种新兴的病原体,在全球范围内引起猪的各种临床症状.
• 当前的诊断方法可能缺乏现场条件所需的速度和可访问性.

研究的目的:

• 开发和优化一种快速,灵敏和特定的异热检测方法,用于检测猪病毒 (PSV).
• 为了能够在猪群中对PSV进行基于现场的,边的诊断.

主要方法:

• 开发一种针对PSV 5′UTR的反转录重组酶聚合酶放大 (RT-RPA) 试验.
• 优化反应参数,包括温度,时间,原料和MgOAc度.
• 分析灵敏度和特异性的评估,并应用于85个野外采集的猪便样本.

主要成果:

• 优化的RT-RPA测定在20分钟内检测到35°C的PSV,具有高灵敏度 (28份).
• 该测试显示出高特异性,并对85个便样本进行了验证,确定了21例阳性病例 (24.7%的阳性率).
• RT-RPA测定结果与黄金标准RT-PCR方法有很好的相关性.

结论:

• 开发的RT-RPA测定提供了PSV的快速,准确和可访问的诊断工具.
• 它的异热性质和对最小设备的要求使它适合在现场设置中进行笔侧测试.
• 这项研究报告了该RT-RPA试验在印度哈里亚纳州猪群中检测PSV的首次成功应用.