在Bacillus licheniformis中通过双氨酸转位途径对氨糖酶的分泌表达
Caizhe Wang1, Dandan Niu1, Nokuthula Peace Mchunu2,3
1Department of Biological Chemical Engineering, College of Chemical Engineering and Materials Science, Tianjin University of Science and Technology, Tianjin 300457, China.
在Bacillus licheniformis中实现了Neisseria polysaccharea amylosucrase (NpAS) 的分泌表达. 双氨酸转位 (TAT) 途径成功分泌了NPAS,使得有效的酶生产成为可能.
科学领域:
- 生物技术是生物技术.
- 酶工程是什么? 酶工程是什么?
- 微生物生理学 微生物生理学
背景情况:
- 氨基糖酶 (EC 2.4.1.4) 是生物技术和食品生产中一个有价值的酶.
- 对于其应用而言,Neisseria polysaccharea amylosucrase (NpAS) 的高效生产是至关重要的.
- 以往使用Sec型信号来对Bacillus licheniformis进行分泌表达的尝试没有成功.
研究的目的:
- 开发一种用于Bacillus licheniformis中NpAS高效分泌表达的新策略.
- 研究双氨酸转位 (TAT) 途径对NpAS细胞外分泌的疗效.
- 为大规模生产NpAS奠定基础.
主要方法:
- 对Bacillus licheniformis CBBD302进行基因改造,通过删除sacB基因来创建一个缺血菌株 (CBBD302B).
- 使用Sec型信号SamyL表达NpAS,随后使用信号SglmU对TAT通路进行调查.
- 在培养基中量化细胞外NpAS活性.
主要成果:
- 在B. licheniformis CBBD302B.中实现了NPAS表达.
- 通过Sec型途径NpAS的细胞外转移没有成功.
- 通过使用TAT途径与信号SglmU.信号SglmU.成功地实现了NPAS的分泌表达和转位.
- 62.81%的总表达的NPAS活性被检测到细胞外.
结论:
- 双氨酸转位 (TAT) 途径对Bacillus物种中NPAS的分泌表达有效.
- 这项研究代表了第一个成功的NpAS在Bacillus宿主中的分泌表达.
- 开发的方法为高效的NpAS工业生产提供了基础.
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