基于重组酶聚合酶放大和侧向流量试验的Epstein-Barr病毒快速检测系统的开发
Yidan Sun1,2, Danni Tang2, Nan Li2
1College of Life Sciences, Wuhan University, Wuhan 430072, China.
Viruses
|January 23, 2024
概括
准确的细胞系研究需要检测埃普斯坦-巴尔病毒 (EBV). 新的聚合酶连锁反应 (PCR) 和重组聚合酶放大 (RPA) 系统有效地识别EBV污染,确保实验完整性.
科学领域:
- 分子生物学分子生物学
- 病毒学 病毒学
- 生物技术是生物技术.
背景情况:
- 细胞产品质量对于可靠的生物研究成果至关重要.
- 爱斯坦-巴尔病毒 (EBV) 是一种普遍存在的潜伏病毒,具有感染风险,可以污染细胞系,危及实验数据.
- 一个细胞系中的EBV污染可以在实验室环境中扩散到其他细胞系.
研究的目的:
- 开发和评估细胞系中爱斯坦-巴尔病毒 (EBV) 的新型检测系统.
- 确保用于生物研究的细胞产品的质量和安全.
- 提供一种可靠的方法来识别实验室细胞系中的EBV污染.
主要方法:
- 开发了三个EBV检测系统:基于聚合酶链反应 (PCR),基于重组聚合酶放大 (RPA) 和联合RPA-侧流分析 (LFA).
- 确定每个系统的最小检测极限.
- 将PCR和RPA检测系统应用于192个细胞系,并与已建立的制药行业标准进行比较.
主要成果:
- 基于RPA和RPA-LFA的系统实现了EBV检测的最低限度为1×103副本数.
- 基于PCR的系统的最低EBV检测极限为1×104个副本数.
- 对192个细胞系的测试确定了10个EBV阳性细胞系,结果与中国制药行业标准一致.
结论:
- 开发的PCR和RPA检测系统可以准确地在细胞系中识别EBV.
- 结合RPA-LFA系统为EBV检测提供了一种简单,快速和可视化解释的方法.
- 这些系统可以集成到常规的实验室质量控制和细胞储存程序中,以保持细胞质量和实验安全,在临床诊断中有潜在的应用.
