改善了在食品加工环境中用于微生物组分析的采样和DNA提取程序
Coral Barcenilla1, José F Cobo-Díaz1, Francesca De Filippis2,3
1Department of Food Hygiene and Technology and Institute of Food Science and Technology, Universidad de León, León, Spain.
Nature protocols
|January 24, 2024
概括
这项研究为食品环境的全元基因组测序 (WMS) 提供了一个新的工作流程. 优化的协议增强了DNA恢复,使得从低生物质样本进行详细的微生物组分析和元基因组组装基因组 (MAG) 成为可能.
科学领域:
- 微生物学 微生物学
- 环境科学 环境科学
- 食品科学 食品科学 食品科学
背景情况:
- 全元基因组测序 (WMS) 提供了对食品环境微生物组的洞察力.
- 食品加工环境中低生物质样本的低DNA产量是WMS的一个主要挑战.
- 现有的WMS协议没有针对食品加工环境进行优化,限制了微生物组分析.
研究的目的:
- 从食品生产和加工环境中开发和验证一个完整的高质量的WMS工作流程.
- 为低生物质样品优化DNA净化方法.
- 为了实现重建元基因组组装基因组 (MAGs) 进行全面的微生物组表征.
主要方法:
- 开发一种优化的DNA净化方法.
- 将工作流应用于来自食品生产和加工环境的样本.
- 全元基因组测序 (WMS) 和生物信息学分析用于MAG重建.
主要成果:
- 该工作流在98%的样本中产生>10 ng DNA,在57.1%的样本中产生>500 ng DNA.
- 每个样本重建了平均12.2个MAG,在单个样本中重建了多达62个MAG.
- 该协议的性能明显优于以前的方法,每样本的MAG<2个.
结论:
- 提出的工作流成功地解决了食品加工环境中的DNA恢复挑战.
- 这种方法可以进行强大的微生物组分析和MAG重建,从而推进环境监测.
- 该协议是在欧盟MASTER项目中开发的,适用于各种食品生产部门.
