基于载体的Aerococcus viridansl-乳酸酸氧化酶的固定

科学领域:

• 生物催化和酶固定化
• 生物传感器开发开发
• 蛋白质化学 蛋白质化学

背景情况:

• 乳酸氧化酶对于生物感知和生物催化是至关重要的.
• 酶固定是提高其稳定性和可重复使用性的关键.
• 之前的研究还没有深入探讨l-乳酸氧化酶固定化策略.

研究的目的:

• 为了研究Aerococcus viridans l-乳酸氧化酶在各种多孔载体上的固定.
• 评估载体矩阵和表面功能群对酶活性和有效性的影响.
• 为了确定有效的l-乳酸氧化酶固定化的最佳条件.

主要方法:

• 将l-乳酸氧化酶固定在聚合甲基酸盐,聚氨和糖载体上.
• 使用载体含有氨基,Ni载酸 (NiNTA) 和环氧化物功能组.
• 评估的载体活性 (Ac) 和固定酶有效性 (ɳ) 相对于蛋白质负载.

主要成果:

• 在含有氨基群的水友性阿加罗斯载体上实现了最佳固定,产生高达1450U/g载体和65%的有效性.
• 随着载体活动 (Ac) 的增加,有效性 (ɳ) 降低,这表明潜在的扩散限制.
• 没有标记的和被标记的l-乳酸氧化酶都与NiNTA载体具有相似的结合.
• 酶吸附在NiNTA载体上几乎是不可逆转的,从氨基载体部分释放 (≤25%),保留原始的特异性活性.

结论:

• 含有氨基群的友载体对于有效的l-乳酸氧化酶固定是必不可少的.
• 离子相互作用在固定过程中对酶表面吸附起重要作用.
• 了解这些固定化要求对于开发先进的生物催化剂和生物传感器至关重要.