鉴定低密度脂蛋白受体相关蛋白1作为CXCL14受体使用化学合成的四功能探针

科学领域:

• 免疫学 免疫学 免疫学
• 化学生物学 化学生物学
• 蛋白质组学是指蛋白质组学.

背景情况:

• CXCL14是一种化学激素,它促进了CpG寡氧核酸 (ODN) 进入免疫细胞的吸收,激活了Toll类受体9 (TLR9).
• 在细胞中CXCL14-CpGODN复合体内部化的确切机制尚不清楚.
• 识别CXCL14受体对于理解其在天生的免疫力中的作用至关重要.

研究的目的:

• 合成CXCL14衍生的光亲和探针,用于识别其细胞受体.
• 阐明CXCL14-CpG ODN复合体进入免疫细胞的分子机制.
• 使用化学蛋白质学发现CXCL14的新型受体.

主要方法:

• 基于CXCL14的光亲和探针的化学合成,采用本地化学结合和马莱胺-醇合.
• 在探头中加入光反应性2-aryl-5-carboxytetrazole (ACT) 和水耐分离的可切割连接器.
• 探针在 RAW264.7 细胞中的定量蛋白质组实验中的应用,包括竞争性蛋白质组分析.

主要成果:

• 合成的CXCL14探针在将CpG ODN与免疫细胞结合时,显示出与原生CXCL14相比的生物活性.
• 定量蛋白质组学确定了CXCL14的众多候选受体.
• 低密度脂蛋白受体相关蛋白1 (LRP1) 被确定为CXCL14的新型受体.
• 破坏LRP1功能会影响CXCL14-CpGODN复合体的吸收.

结论:

• 合成CXCL14光亲和探针是发现新型受体的强大工具.
• LRP1是CXCL14的新发现受体,介导CXCL14-CpGODN复合体的吸收.
• 这项研究有助于进一步了解CXCL14的分子功能和先天免疫系统机制.