在益生菌中使用验证的PMA-qPCR方法识别和量化可行的Lacticaseibacillus rhamnosus

科学领域:

• 微生物学 微生物学
• 分子生物学分子生物学
• 食品科学 食品科学 食品科学

背景情况:

• 在复杂的益生菌配方中精确量化可活性的细菌存在重大挑战.
• 诸如一氧化 (PMA) 与定量PCR (qPCR) 结合的分子方法正在出现,用于精确的可活细胞计数.
• 商业产品中益生菌的物种和菌株级别识别需要强大且经过验证的方法.

研究的目的:

• 建立和验证一种可靠的PMA-qPCR方法,用于准确检测和量化可行的Lacticaseibacillus rhamnosus.
• 系统地评估关键性能指标,包括相对真实性,准确性,量化极限,线性和范围.
• 确认针对L. rhamnosus.开发的方法的特异性和包容性.

主要方法:

• 开发一种优化用于区分活体和死体乳酸酶菌 (Lacticaseibacillus rhamnosus) 治疗方案.
• 量化PCR (qPCR) 试验设计和验证,使用针对L. rhamnosus.
• 使用包容性/排他性面板,标准曲线和对各种益生菌样本的应用,对PMA-qPCR方法的系统验证.

主要成果:

• 开发的PMA-qPCR方法对L. rhamnosus具有很高的特异性,通过包容性和排他性测试得到证实.
• 在各种L. rhamnosus菌株中,PMA治疗有效地区分了活细胞和死细胞.
• 该方法在纯培养和复杂益生菌产品中准确量化了可行的L. rhamnosus从10^3到10^8 CFU/mL,与理论值有很好的一致性.

结论:

• 一种经过验证的PMA-qPCR方法为准确量化可行的Lacticaseibacillus rhamnosus提供了可靠的工具.
• 这种方法在益生菌产品的质量控制和监管监督中具有工业应用的潜力.
• 已建立的协议有效地解决了复杂益生菌矩阵中可行的细菌计数的挑战.