使用LC-MS/MS在小鼠器官中的代谢在体内跟踪
Siva Swapna Kasarla1, Vera Flocke2, Nay Min Thaw Saw1
1Leibniz-Institut für Analytische Wissenschaften-ISAS-e.V., Otto-Hahn-Str. 6b, Dortmund 44227, Germany.
Journal of chromatography. A
|February 1, 2024
概括
这项研究引入了一种新的液体染色学-并联质谱法 (LC-MS/MS) 方法,用于追踪鼠标器官中用标记的葡萄糖代谢. 该工作流允许对代谢物进行敏感的检测和量化,从而推进组织代谢学研究.
科学领域:
- 生物化学 生物化学
- 代谢学 代谢学 代谢学
- 分析化学 分析化学
背景情况:
- 用 (2H) 标记稳定同位素 (SIL) 是一种简单,广泛适用的方法,用于追踪代谢途径.
- 标记的前体很少用于LC-MS/MS代谢学,尽管它们具有敏感和精确组织代谢分析的潜力.
- 现有的方法缺乏全面的工作流程来跟踪体内的代谢.
研究的目的:
- 开发和验证LC-MS/MS引导的工作流程,用于追踪小鼠器官中的代谢.
- 为了使敏感的检测和定量各种组织中脱代谢产物.
- 通过关键的代谢途径,绘制除葡萄糖体内代谢命运的地图.
主要方法:
- 在小鼠体内注入2H7-葡萄糖,然后进行器官隔离和代谢物提取.
- 基于Zwitterion的水友互动液态染色学 (HILIC) 与高分辨率联质谱学 (LC-MS/MS) 相结合.
- 有针对性的数据采集,使用光谱库 (>400标准),并通过路径映射进行多变量数据分析.
主要成果:
- 在五个主要小鼠器官 (肝脏,脏,大脑,棕色脂肪组织,心脏) 中对100多种代谢物的量化.
- 在糖解,TCA循环和氨基酸途径中对代谢物的同位素的映射.
- 对矩阵效应,规范化和量化方法的验证.
结论:
- 开发的LC-MS/MS工作流程有效地追踪了小鼠组织中的代谢.
- 这种方法提供了敏感和精确的组织代谢量,并跟踪体内代谢命运.
- 这项研究为动物模型和临床环境中的2H标记组织代谢研究开辟了新的途径.
