使用气体染色学-质谱学优化便样本中有机酸的定量协议

科学领域:

• 分析化学 分析化学
• 代谢学 代谢学 代谢学
• 生物化学 生物化学

背景情况:

• 有机酸 (OAs) 在许多细胞内代谢途径中至关重要,包括TCA循环,脂肪酸氧化和糖解.
• 精确检测便中的OA对于了解各种疾病中的代谢变化至关重要.
• 目前用于便OA分析的分析协议还不够发展.

研究的目的:

• 开发和优化一种分析协议,用于在老鼠便样本中同时量化23个OA.
• 验证协议的性能特征,包括线性,精度和检测/定量限制.
• 评估提取的OA的稳定性,用于大规模样本分析,并将该方法应用于疾病模型.

主要方法:

• 开发了一种使用染色学质谱学的新方案,用于同时量化OA.
• 最佳的提取方法是将40毫克便样品与异醇,乙烯和脱离离子水混合 (3:2:2电量比),然后进行超声波提取.
• 使用80μL衍生剂的衍生反应;稳定性在-20°C下进行评估.

主要成果:

• 优化的协议显示出出色的线性 (R2 ≥0.9906) 和令人满意的精度 (RSD% ≤14.87%).
• 实现了低检测值 (0.0011μg/mL) 和定量值 (0.0051.5μg/mL).
• 提取的OAs的干燥残留物在-20°C时表现出良好的稳定性,适合大规模分析.

结论:

• 成功建立了一个强大的和优化的染色体质谱协议,用于量化大鼠的23种便OA.
• 该方法适用于大规模样本分析,因为提取的OAs的稳定性.
• 该协议被有效地应用,以区分正常与非酒精性脂肪肝病老鼠的OA概况,帮助疾病机制研究.