使用oligo-dT固定电聚合物纳米纤维吸附剂改进了mRNA亲和染色体结合能力和吞吐量
Emily A Dewar1, Peter Guterstam2, David Holland3
1Process Research and Development, Merck & Co., Inc., Rahway, NJ, United States.
Journal of chromatography. A
|February 4, 2024
概括
使用电纤维素纳米纤维 (FibroTM) 的新色谱介质通过提供更高的结合能力和与现有方法相比的产量来显著提高信使RNA (mRNA) 净化,解决治疗性mRNA生产的挑战.
科学领域:
- 生物技术和生物加工
- 染色学和分离科学 染色学和分离科学
- 制造核酸治疗药物 制造核酸治疗药物
背景情况:
- 对mRNA治疗药物的需求不断增长,需要高效的净化平台.
- 目前使用oligo-deoxythymidilic acid (oligodT) 的杂交-亲和色谱在结合能力和流速方面面临限制.
- 现有的商业树脂 (POROSTM) 和单体 (CIMmultus®) 在质量转移,流速和信使RNA (mRNA) 的结合能力之间存在权衡.
研究的目的:
- 评估一种用于mRNA净化的新型原型染色体介质 (FibroTM).
- 将FibroTM的动态结合能力 (DBC) 与商业POROSTM和CIMmultus®树脂进行比较.
- 评估居住时间,mRNA大小和缓冲组合对DBC的影响.
主要方法:
- 在电纤维素纳米纤维 (FibroTM) 上开发了一种原型染色体介质,其中包含固定的小物质.
- 用四个多基尼化mRNA (∼1900-4300核酸) 进行FibroTM,POROSTM和CIMmultus®列的DBC比较.
- 调查DBC对停留时间和结合缓冲组合的依赖性;还进行了反向大小排除 (ISE) 实验.
主要成果:
- 在测试条件下,FibroTM的DBC比CIMmultus®高2至4倍,比POROSTM高2至13倍.
- CIMmultus®显示DBC对居住时间和mRNA大小的依赖性最小;FibroTM和POROSTM DBC增加了较慢的流速和较短的mRNA.
- 在所有三个矩阵中,体外转录 (IVT) mRNA的净化产量,质量和纯度都是一致的.
结论:
- 与商业替代品相比,OligodT FibroTM原型为mRNA净化提供了显著改善的动态结合能力.
- 纤维TM提供与POROSTM和CIMmultus®相当的产品配置文件 (产量,质量,纯度).
- 这种新材料显示了增强大规模mRNA净化过程的潜力,用于治疗应用.
