基于三明治ELISA和突变基因分析的人类血小板的高通量CD36表型
Honghong He1, Longhai Tang1, Yiming Jin1
1Suzhou Blood Center, Suzhou, China.
概括
一个新的三明治ELISA可靠地选血小板CD36 (pCD36) 缺乏,这对于管理出血障碍和输血反应至关重要. 这种方法有助于识别pCD36阴性表型的捐赠者,以改善患者护理.
科学领域:
- 免疫学 免疫学 免疫学
- 血液学 血液学 血液学
- 遗传学 是一个遗传学.
背景情况:
- CD36缺乏与胎儿/新生儿免疫性血小板缺血和输血问题有关,特别是在亚洲和非洲人群中.
- 临床需要快速,高通量血小板CD36 (pCD36) 现型化,以帮助输血和建立pCD36阴性供体数据库.
研究的目的:
- 开发和验证可靠的三明治酶链接免疫吸收试验 (ELISA) 高通量pCD36表型化.
- 在健康的献血者群体中确定CD36缺乏的频率.
主要方法:
- 开发了一种使用抗CD36单克隆抗体进行pCD36表型化的三明治ELISA.
- 使用测试内部和测试间变化系数 (CV) 评估测试可靠性.
- 选了1691个献血样本,通过流动细胞计 (FC) 确认pCD36缺乏,并通过基于聚合酶链反应序列的类型化 (PCR-SBT) 鉴定突变.
主要成果:
- 这种三明治ELISA的可靠性很高 (内测CV:2.1-4.8%;内测CV:2.3-5.2%).
- 查发现了1691名捐赠者的36个pCD36阴性样本,产生2.13%的CD36缺乏频率.
- 在13个pCD36阴性样本中使用PCR-SBT识别了10种类型的突变.
结论:
- 已经开发和描述了用于高通量pCD36表达查的高度可靠的三明治ELISA.
- 这种新的方法适用于临床应用,并有助于创建pCD36阴性表型供体数据库.
