用于单细胞测序的单细胞悬浮剂的制备,从小鼠的动脉中取出

科学领域:

• 心血管生物学 心血管生物学
• 细胞和分子医学 细胞和分子医学
• 动脉样硬化研究 动脉样硬化研究

背景情况:

• 动脉为大脑提供有氧血液;狭窄症涉及斑块的积累.
• 了解动脉细胞组成对于治疗动脉样硬化至关重要.
• 目前,对于从动脉中取出单细胞悬浮液的现有方案是缺乏的.

研究的目的:

• 建立一个可靠的协议,从正常的动脉准备单细胞悬浮液.
• 在解离过程中最大限度地减少细胞损伤,用于单细胞分析.
• 为了使单细胞测序的动脉组织.

主要方法:

• 一种两步的酶性消化方法,整合了原酶/DNase和素.
• 酸/酸 (AO/PI) 双光计数用于细胞活力和度评估.
• 单细胞数据处理用于分析转录基因特征.

主要成果:

• 开发的协议产生了单细胞悬浮体,细胞活力超过85%,细胞度高.
• 该协议符合单细胞测序的严格要求.
• 分析揭示了多种细胞类型,包括血管光滑肌细胞,纤维细胞,内皮细胞和免疫细胞.

结论:

• 这种新的两步消化方案有效地从正常的动脉中制备出高质量的单细胞悬浮液.
• 这种方法可以对动脉细胞组成进行全面的单细胞分析.
• 该方案显示了适应其他血管组织的潜力.