免疫代谢蛋白修饰S-2-succinocysteine和2,3-dicarboxypropylcysteine的量化

科学领域:

• 免疫代谢过程中的免疫代谢.
• 后翻译修改后的修改.
• 质谱测量质量谱测量

背景情况:

• 三碳酸 (TCA) 循环的代谢物 fumarate 通过与氨酸的非酶反应形成S-(2-succino) 氨酸 (2SC),称为蛋白质化.
• 免疫代谢物伊塔科纳酸在激活的巨细胞和微质细胞中积聚,与氨酸反应形成2,3-二碳氧烯基氨酸 (2,3-DCP) 或蛋白质二碳氧烯酸.
• 免疫细胞中烟酸盐和伊塔康酸盐水平的动态变化与蛋白质化和二氧化化相关.

研究的目的:

• 开发和应用一种基于质谱的方法,同时区分和量化蛋白质化 (2SC) 和二碳氧化化 (2,3-DCP).
• 为了研究2SC和2,3-DCP在脂聚糖 (LPS) 刺激的微质中的水平.
• 为了确定免疫细胞中因伊塔科纳酸和烟酸酸蛋白质修饰的固体几何学.

主要方法:

• 从蛋白质水解盐中生成2SC和2,3-DCP的乙烯 Ester.
• 使用稳定同位素稀释质谱法 (SID-MS) 进行量化.
• 减少的囊蛋白与酸的化,以形成S-碳素甲基囊蛋白 (CMC) 用于石化测量分析.

主要成果:

• 高度侵略性增殖不朽化 (HAPI) 微质的LPS刺激导致伊塔科纳酸衍生的2,3-DCP增加,但不是酸衍生的2SC.
• 立体测量测量显示,在LPS刺激后,2,3-DCP的总囊蛋白从1.57%增加到9.07%.
• 现有的抗-2SC抗体与2,3-DCP交叉反应,这表明"酸盐部分"可能是一个更准确的抗原描述符.

结论:

• 开发的质谱学方法允许同时量化蛋白质化和二氧化化.
• 在LPS激活的微质中,伊塔科纳酸衍生的蛋白质二碳 Propylation 显著上调.
• 这种定量方法在研究免疫代谢物质在代谢疾病和炎症中的作用方面具有广泛的应用.