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Updated: Jul 4, 2025
10:09
In Ovo and Ex Ovo Methods to Study Avian Inner Ear Development
Published on: June 16, 2022
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优化卵细胞电穿孔用于猪胚胎的基因改造:对帕氏基因激活的评估
Celia Piñeiro-Silva1, Joaquín Gadea1
1Department of Physiology, University of Murcia, International Excellence Campus for Higher Education and Research "Campus Mare Nostrum" and Institute for Biomedical Research of Murcia (IMIB-Arrixaca), 30100, Murcia, Spain.
Theriogenology
|February 7, 2024
概括
在体外受精 (IVF) 之前的卵细胞电解增加了胚胎激活,也增加了伴生子的形成. 优质MEM介质和IVF后7小时的时间优化了早期胚胎中的基因编辑.
科学领域:
- 生殖生物学 生殖生物学
- 发展生物学 发展生物学
- 遗传学 是一个遗传学.
背景情况:
- 了解新技术对早期胚胎发育的影响,在生殖生物学中至关重要.
- 在体外受精 (IVF) 之前卵细胞电激活对胚胎发育的影响仍然不清楚.
研究的目的:
- 调查在试管婴儿前卵细胞电孔对早期胚胎发育的影响.
- 为了区分真正的胚胎与使用TPCN2淘汰 (KO) 雄性对等位基因评估的伴生胚胎.
- 为潜在的基因编辑应用优化电穿孔参数,包括介质和时间.
主要方法:
- 进行了三项实验,涉及与随后的试管婴儿进行或不进行卵细胞电穿孔.
- 电穿孔介质的比较 (Opti-MEM与无核酶双重缓冲) 和相对于IVF的时间.
- 由此产生的胚芽细胞的基因型分析,以识别亲子细胞并评估KO等位基因的存在.
主要成果:
- 电穿孔增加了卵细胞激活率和单个前核发生,但没有影响精子透.
- 用电穿孔改善了裂痕率,但胚胎细胞的裂痕率保持不变;甲状腺细胞的比例显著增加.
- 优选MEM优于DB;试管婴儿后7小时的电穿孔显示出更高的突变率,尽管伴生细胞率在时间组之间是相似的.
结论:
- 卵细胞电穿孔显示出创造转基因胚胎的潜力,但需要仔细优化.
- 介质选择 (Opti-MEM) 和时间 (对突变率来说IVF后7小时) 是关键因素.
- 需要进行进一步的研究,以减少遗传激活,同时保持基因编辑猪胚胎生成的高突变率.
