细胞因子作为传染性病毒标位的快速指标在过程开发过程中
Johanna Bacher1, Narges Lali1, Florian Steiner2
1acib - Austrian Centre of Industrial Biotechnology, Krenngasse 37, Graz A-8010, Austria; Department of Biotechnology, Institute of Bioprocess Science and Engineering, University of Natural Resources and Life Sciences Vienna, Vienna, Austria.
Journal of biotechnology
|February 7, 2024
概括
快速确定传染性病毒标位,使用细胞因子反应,而不是传统的基于细胞的测试. 这种方法显著加快活病毒的生产和工艺开发.
科学领域:
- 病毒学 病毒学
- 免疫学 免疫学 免疫学
- 生物技术是生物技术.
背景情况:
- 传统的传染性病毒标位测定如TCID50和PSU是耗时的,通常超过一周的结果.
- 这一漫长的过程显著阻碍了活病毒的高效生产和工艺开发.
研究的目的:
- 开发一种快速的方法来确定传染性病毒标位.
- 为了利用维罗细胞的亲炎性细胞因子反应作为传染性标位测量的替代品.
- 为了建立一个更快的替代程序开发传统的基于细胞的测试.
主要方法:
- 一种重组麻疹疫苗病毒 (MVV) 用Vero细胞系作为模型系统.
- 细胞分泌的促炎细胞因子 (MCP-1和RANTES) 被测量.
- 细胞因子水平与传统组织培养感染剂量50 (TCID50) 测量相关.
主要成果:
- 细胞因子分泌 (MCP-1和RANTES) 显示了对MVV感染的剂量和时间依赖的反应.
- 细胞因子水平与TCID50有很强的相关性 (MCP-1的R2=0.86,RANTES的R2=0.83).
- 细胞因子反应是针对传染性病毒颗粒的特异性,未被过的病毒种子检测到.
结论:
- 促炎性细胞因子反应为确定传染性病毒标位提供了一种快速方法 (小时与天).
- 这种基于细胞因子的测定适用于工艺开发和控制,包括监控净化程序.
- 选择特定的细胞因子候选人取决于它们的分泌特征和对过程变异的敏感性.
